本試劑盒針對東部馬腦脊髓炎病毒特異性基因設(shè)計(jì)PCR擴(kuò)增體系，可精準(zhǔn)檢測馬類、媒介蚊蟲樣本中的病毒核酸。產(chǎn)品靈敏度高、生物安全性好，能夠早期篩查馬腦脊髓炎病毒感染，適用于馬屬動(dòng)物疫病診斷、蟲媒病毒監(jiān)測和畜牧養(yǎng)殖疫情防控。
產(chǎn)品名稱 | 東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014110 |
英文名稱 | Eastern Equine Encephalomyelitis Virus(EEEV )RTPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
血清 RNA 逆轉(zhuǎn)錄，靶向病毒 E2 包膜基因 RT-PCR 特異性篩查蚊傳腦炎病毒。
一步法 Taqman 熒光 RT-qPCR，探針結(jié)合病毒 NS1 基因，微量血漿病毒可檢出。
患者腦脊液提取總 RNA 逆轉(zhuǎn)錄，病毒特異性引物擴(kuò)增條帶判定感染。
?操作步驟?：
1. 樣本處理
提取待測樣本RNA，建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽性對照稀釋（示例：6個(gè)梯度）
標(biāo)記離心管（7至2號(hào)），每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽性對照，避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補(bǔ)至20 |
4. 上機(jī)程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘（可選，根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整）。
預(yù)變性：95℃ 2分鐘。
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)），共40循環(huán)。
?注意事項(xiàng)?：
避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），防止污染。
陽性對照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途，不可用于臨床診斷。
操作時(shí)需穿戴防護(hù)裝備，避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無菌原則，運(yùn)輸時(shí)使用干冰或冰袋保存。
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關(guān)鍵字： 東部馬腦脊髓炎病毒;PCR檢測試劑盒;
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