?產(chǎn)品名稱:革蜱PCR檢測試劑盒
英文名稱:Dermacenter spp.PCR
貨號:YS-P014090
分類:PCR檢測試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測原理:
革蜱屬線粒體 COI 通用保守基因,蜱蟲樣本 DNA 廣譜鑒定各類致病革蜱媒介。
16S rRNA 熒光定量 qPCR 探針特異性識別革蜱核酸,區(qū)分硬蜱其他屬種類。
蜱蟲軀體研磨裂解提取基因組 DNA,屬通用引物擴(kuò)增特征條帶判定革蜱。
實驗流程:
樣本處理(樣本處理區(qū))
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸,避免交叉污染。
試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
反應(yīng)體系(20μL/管):19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液,分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
循環(huán)參數(shù):
預(yù)變性:95℃ 2min(1循環(huán));
擴(kuò)增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循環(huán),60℃時采集熒光信號,F(xiàn)AM通道)。
結(jié)果分析
陽性:Ct值≤40,擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長;
陰性:無Ct值或曲線平直;
可疑:40<Ct≤45,需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求:陽性質(zhì)控Ct≤32,陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
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注意事項:
所有試劑避免反復(fù)凍融,可分裝小體積凍存;融化后冰上放置不超過 2 h,酶失活會直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高,開蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶,槍頭一次性使用;實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測,嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸,減少抑制劑干擾
關(guān)鍵字: 革蜱;PCR檢測試劑盒;
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