本試劑盒采用腸桿菌屬通用保守基因擴(kuò)增技術(shù)，可廣譜檢測(cè)大腸桿菌、腸桿菌、克雷伯菌等各類(lèi)腸桿菌屬致病菌核酸。試劑盒通用性強(qiáng)、篩查效率高，適用于食品、水體、臨床、環(huán)境樣本的大批量腸道菌群污染初篩檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 腸桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014140 |
英文名稱(chēng) | Enterobacter spp.PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
腸桿菌科腸桿菌屬共有的 dnaJ 保守基因，食品、臨床樣本廣譜篩查屬內(nèi)菌種。
屬通用 SYBR Green qPCR 擴(kuò)增 16S rRNA 基因，熔解曲線區(qū)分腸桿菌與克雷伯菌。
樣本增菌液提取細(xì)菌基因組 DNA，通用引物擴(kuò)增保守間隔基因初篩腸桿菌。
?操作步驟?：
RNA提?。菏褂门涮自噭┗蛏虡I(yè)試劑盒提取樣品RNA。
反應(yīng)配制：按說(shuō)明書(shū)比例混合預(yù)混液、引物探針、模板RNA及對(duì)照。
PCR擴(kuò)增：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40個(gè)循環(huán)），于FAM通道采集信號(hào)。
結(jié)果分析：通過(guò)Ct值判定病毒含量，陽(yáng)性對(duì)照需出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無(wú)信號(hào)。
?注意事項(xiàng)?：
試劑禁止反復(fù)凍融，分裝為小體積 - 20℃保存，融化后冰上放置不超過(guò) 2 h
所有耗材必須無(wú) DNase/RNase，吸頭一次性使用，廢液、廢棄 PCR 管 121℃高壓滅菌后丟棄
陽(yáng)性質(zhì)粒高拷貝，開(kāi)蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
試劑盒僅限科研檢測(cè)，禁止人、臨床樣本檢測(cè)
試劑盒過(guò)期、試劑渾濁、變色禁止使用
若大量樣本出現(xiàn)陰性對(duì)照帶污染，立即更換全新試劑盒，徹底紫外消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器
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