?產(chǎn)品名稱：馬腺病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱：Equine Adenovirus(EAdV)PCR
貨號：YS-P014160
分類：PCR檢測試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測原理：
引物靶向馬腺病毒六鄰體保守基因，不擴增人、犬腺病毒序列
馬鼻拭子細(xì)胞裂解提取病毒雙鏈 DNA，純化去除黏液蛋白抑制因子
擴增循環(huán)中熒光持續(xù)累積，根據(jù) Ct 值高低判斷馬匹病毒感染載量
實驗流程：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補充無核酸酶水至終體積。
PCR擴增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗證擴增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測或結(jié)合熔解曲線分析。
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注意事項：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸取；
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴增產(chǎn)物、實驗廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測，禁止人體臨床檢測；
移液器、操作臺定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
關(guān)鍵字： 馬腺病毒;PCR檢測試劑盒;
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