小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
英文名稱(chēng) | Mouse Small Intestine Mucosal Epithelial Cells | 種屬 | 小鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 貨號(hào) | A01X1805 |
組織來(lái)源 | 小腸組織 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠小腸黏膜上皮分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門(mén)與胃相通，下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連，是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤(pán)曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門(mén)，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因?yàn)槭澄锝?jīng)過(guò)小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后，基本上完成了消化過(guò)程，同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開(kāi)口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動(dòng)的動(dòng)力，促使食物向下運(yùn)動(dòng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的道防線(xiàn)。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。
方法簡(jiǎn)介 公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
與細(xì)胞系的主要區(qū)別：
特征 原代細(xì)胞 永生化細(xì)胞系 (如HeLa細(xì)胞)
來(lái)源 直接從生物體組織分離 通常經(jīng)過(guò)基因改造或來(lái)源于癌組織
壽命 有限，受海弗利克極限限制 無(wú)限，可無(wú)限增殖（永生化）
遺傳背景 穩(wěn)定，保留供體特征 不穩(wěn)定，易發(fā)生遺傳漂變
生理相關(guān)性 高，更接近體內(nèi)真實(shí)情況 較低，可能丟失組織特異性特征
培養(yǎng)難度 高，對(duì)培養(yǎng)條件要求苛刻 低，易于培養(yǎng)和維持
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細(xì)胞培養(yǎng)操作
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)，形成細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞生長(zhǎng)較快。
取材與剪切
同樣在無(wú)菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當(dāng)搖動(dòng)或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當(dāng)組織分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞時(shí)，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細(xì)胞懸液通過(guò)篩網(wǎng)過(guò)濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，并調(diào)整細(xì)胞密度至實(shí)驗(yàn)所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。
將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
關(guān)鍵字： 小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞;小腸組織;貼壁;
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