1.產(chǎn)品名稱：小鼠小腸黏膜上皮細胞
2.組織來源：小腸組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠小腸黏膜上皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責(zé)腸蠕動的動力，促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。
本公司生產(chǎn)的小鼠小腸黏膜上皮細胞采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)Cytokeratin-18/PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
a、細胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細胞密度超80%，即可進行傳代培養(yǎng)。
貼壁細胞傳代步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1：2的比例進行分瓶傳代（兩個T25瓶），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
懸浮細胞傳代步驟日下：
1、半換液法
半換液處理，豎著培養(yǎng)瓶在培養(yǎng)箱靜置1小時左右，輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基，然后補給3ml的完全培養(yǎng)基，如果培養(yǎng)基變色慢，可直接加500ul左右FBS，傳代的時候可以直接補給5ml培養(yǎng)基 分兩個培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次，去掉死細胞。
2、離心換液法
如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
b、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細胞凍存管（注意佩戴防護面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
小鼠小腸黏膜上皮細胞注意事項：有些細胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
關(guān)鍵字： 小鼠小腸黏膜上皮細胞;進口原裝原管細胞;ATCC細胞引種;ATCC細胞代購;雅吉細胞庫;
上海雅吉生物科技的核心業(yè)務(wù)主要圍繞生命科學(xué)研究所需的各類試劑、細胞、抗體及技術(shù)服務(wù)展開，具體可歸納為以下幾個方面：
細胞產(chǎn)品與技術(shù)平臺：
細胞產(chǎn)品：提供包括正常細胞、腫瘤細胞、腫瘤耐藥細胞在內(nèi)的多種細胞系。同時，公司也是美國ScienCell等品牌的原代細胞產(chǎn)品的代理商。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建服務(wù)：公司具備豐富的蛋白表達研究經(jīng)驗，能夠為客戶提供從基因序列到穩(wěn)定細胞株交付的一站式定制服務(wù)，應(yīng)用于基因功能研究、藥物篩選和重組蛋白生產(chǎn)等領(lǐng)域。
科研試劑：這是公司的基礎(chǔ)和優(yōu)勢業(yè)務(wù)。產(chǎn)品線全面覆蓋了分子生物學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)和微生物學(xué)等多個學(xué)科。
ELISA試劑盒：提供人、大鼠、小鼠、犬、魚、雞、牛等多種物種以及植物的ELISA檢測試劑盒，在國內(nèi)眾多重點實驗室中廣泛使用并被科研文獻引用。生化試劑、抗體與血清：提供包括一抗、二抗、單克隆/多克隆抗體在內(nèi)的多種抗體產(chǎn)品，以及胎牛血清等細胞培養(yǎng)用血清。
蛋白研究相關(guān)試劑盒：提供超過300種針對不同樣本來源（動物、植物、微生物）和不同細胞器（如線粒體、外泌體）的蛋白提取及檢測試劑盒。