產品介紹：
湖羊瘤胃上皮細胞永生化 細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產品可保持 湖羊瘤胃上皮細胞永生化 細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產品中已包含 湖羊瘤胃上皮細胞永生化 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于 湖羊瘤胃上皮細胞永生化 細胞的培養(yǎng)。
上皮細胞培養(yǎng)體系 500 ml
產品名稱 | 湖羊瘤胃上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | P-X582 |
英文名稱 | 湖羊瘤胃上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100ML、500ML |
產品主要成分
上皮細胞基礎培養(yǎng)基 460 ml 2℃～8℃ / 12個月
上皮細胞培養(yǎng)添加劑 5 ml -20℃ / 12個月
特級胎牛血清 30 ml -20℃ / 12個月
P/S青霉素-鏈霉素 5 ml -20℃ / 12個月
運輸和保存
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法：配置好的完全培養(yǎng)基2℃～8℃，保存2個月；基礎培養(yǎng)基2℃～8℃，添加劑、血清、雙抗 -20℃，保存12個月。
質量控制
檢測項目 | 質量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
內毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
無菌檢測 | 細菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 |
支原體 | 陰性 |
細胞生長試驗 | 細胞形態(tài) | 正常 |
細胞生長實驗 | 合格 |
實驗原理：
以DMEM高糖培養(yǎng)基為基礎，添加10%優(yōu)質胎牛血清和1%抗生素，模擬湖羊瘤胃上皮細胞永生化細胞的生長環(huán)境，為細胞提供充足的營養(yǎng)物質和能量，支持細胞的貼壁生長和增殖，維持細胞的瘤胃上皮細胞特性，用于湖羊消化生理的研究。
使用方法：
（一）常規(guī)使用步驟
培養(yǎng)基從 2~8℃取出，37℃水浴預熱 15~20min，避免冷刺激細胞。
超凈臺內用 75% 酒精擦拭培養(yǎng)基瓶身，無菌操作開封。
吸棄培養(yǎng)瓶中舊培養(yǎng)基，加入預熱的專用培養(yǎng)基（T25 瓶加 5~6mL，T75 瓶加 12~15mL）。
置于37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
（二）細胞復蘇
液氮取出凍存管，37℃快速融化（1~2min），75% 酒精消毒后轉入超凈臺。
細胞懸液轉移至含 5mL 預熱專用培養(yǎng)基的 15mL 離心管，1000rpm（200g）離心 3min，棄上清。
加 5mL 專用培養(yǎng)基重懸，轉入 T25 培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)，次日換液去除死細胞。
（三）細胞傳代（80~90% 匯合度）
吸棄舊培養(yǎng)基，無菌 PBS（無 Ca2?/Mg2?）洗細胞 1~2 次，吸棄 PBS。
T25 瓶加 1mL 0.25% 胰酶 - EDTA，37℃消化1~3min，顯微鏡下見細胞變圓、間隙增大即終止。
加 3~4mL 專用培養(yǎng)基終止消化，輕柔吹打至單細胞懸液，1000rpm 離心 3min，棄上清。
專用培養(yǎng)基重懸，按1:3~1:4分瓶，補足培養(yǎng)基后 37℃培養(yǎng)。
（四）細胞凍存
傳代步驟收集細胞，離心棄上清。
凍存液（90%FBS+10%DMSO）重懸，密度1~3×10?細胞 / 管。
分裝入凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜，次日轉入液氮長期保存。
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小鼠雜交瘤細胞；HB12R13D7 | 庚型肝炎病毒抗體(IgM)ELISA試劑盒 |
牛腎細胞；MDBK | 人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒 |
注意事項：
所有操作嚴格遵循無菌規(guī)范，避免細胞交叉污染，每次操作僅處理一株細胞
培養(yǎng)基開封后盡快使用，避免長時間暴露于室溫，未用完部分2-8℃避光保存
細胞培養(yǎng)過程中，定期顯微鏡觀察細胞狀態(tài)，及時更換培養(yǎng)基或傳代，一般2-3天更換一次培養(yǎng)基
實驗產生的廢棄培養(yǎng)基、細胞懸液等生物廢棄物，按規(guī)定進行消毒處理后再排放
若使用預配置完全培養(yǎng)基，無需額外添加血清、雙抗等成分，直接使用即可
關鍵字： 湖羊瘤胃上皮細胞;永生化;細胞專用培養(yǎng)基;
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