產(chǎn)品介紹：
雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞的培養(yǎng)。
上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 500 ml
產(chǎn)品名稱 | 雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | P-X625 |
英文名稱 | 雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100ML、500ML |
產(chǎn)品主要成分
上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 440 ml 2℃～8℃ / 12個月
上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 5 ml -20℃ / 12個月
特級胎牛血清 50 ml -20℃ / 12個月
P/S青霉素-鏈霉素 5 ml -20℃ / 12個月
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：配置好的完全培養(yǎng)基2℃～8℃，保存2個月；基礎(chǔ)培養(yǎng)基2℃～8℃，添加劑、血清、雙抗 -20℃，保存6個月?
質(zhì)量控制
檢測項(xiàng)目 | 質(zhì)量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
內(nèi)毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
無菌檢測 | 細(xì)菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 |
支原體 | 陰性 |
細(xì)胞生長試驗(yàn) | 細(xì)胞形態(tài) | 正常 |
細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) | 合格 |
實(shí)驗(yàn)原理：
以DMEM/F12培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清、1%雙抗（青霉素100U/mL+鏈霉素100ug/mL）及0.1%胰島素轉(zhuǎn)鐵蛋白硒（ITS），模擬雞腎小管上皮永生化細(xì)胞的體內(nèi)生長環(huán)境。培養(yǎng)基中含有的生長因子和營養(yǎng)成分可支持細(xì)胞貼壁生長、增殖，同時通過添加特定成分抑制雜細(xì)胞生長，維持細(xì)胞的腎小管上皮細(xì)胞特性，用于雞腎臟疾病的機(jī)制研究及藥物篩選實(shí)驗(yàn)。
培養(yǎng)基配置步驟：
1. 配置前準(zhǔn)備
試劑與耗材：MEM培養(yǎng)基粉末（或液體）、優(yōu)質(zhì)胎牛血清、青霉素-鏈霉素混合液、5-溴-2'-脫氧尿苷（可選）、無菌超純水、0.22μm無菌濾膜、無菌血清瓶、移液槍、無菌移液管等
無菌環(huán)境：超凈工作臺提前開啟紫外燈照射30分鐘消毒，實(shí)驗(yàn)人員佩戴無菌手套、口罩，操作前用75%酒精擦拭雙手和工作臺
2. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基配置（以粉末MEM為例）
按照MEM培養(yǎng)基說明書的比例，將適量培養(yǎng)基粉末加入到裝有900ml無菌超純水的無菌燒杯中
用磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?，直至培養(yǎng)基粉末完全溶解
加入適量碳酸氫鈉粉末（根據(jù)說明書調(diào)整），調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值至7.2-7.4
將溶液通過0.22μm無菌濾膜過濾除菌，轉(zhuǎn)移至無菌血清瓶中，標(biāo)注“MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基”及配置日期
3. 完全培養(yǎng)基配置
在無菌條件下，向MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入100ml優(yōu)質(zhì)胎牛血清（使血清終濃度為10%）
加入10ml青霉素-鏈霉素混合液（使雙抗終濃度為1%）
若需要篩選TK-細(xì)胞，加入5-溴-2'-脫氧尿苷，使其終濃度為0.015mg/ml
輕輕搖晃血清瓶，使各成分充分混合，標(biāo)注培養(yǎng)基名稱及配置日期
4℃避光保存，使用前提前放置至室溫
4. 培養(yǎng)基質(zhì)量檢測
配置完成后，取少量培養(yǎng)基接種于無菌培養(yǎng)瓶中，37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時
觀察培養(yǎng)基是否渾濁、有無菌落生長，確認(rèn)無菌后方可用于細(xì)胞培養(yǎng)
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注意事項(xiàng)：
所有操作嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范，避免細(xì)胞交叉污染，每次操作僅處理一株細(xì)胞
培養(yǎng)基開封后盡快使用，避免長時間暴露于室溫，未用完部分2-8℃避光保存
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，定期顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)，及時更換培養(yǎng)基或傳代，一般2-3天更換一次培養(yǎng)基
實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄培養(yǎng)基、細(xì)胞懸液等生物廢棄物，按規(guī)定進(jìn)行消毒處理后再排放
若使用預(yù)配置完全培養(yǎng)基，無需額外添加血清、雙抗等成分，直接使用即可
關(guān)鍵字： 雞腎小管上皮細(xì)胞;永生化;細(xì)胞專用培養(yǎng)基;
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