細胞簡介：

鼓膜也稱耳膜，為一彈性灰白色半透明薄膜，將外耳道與中耳隔開。鼓膜穿孔不能，可能與干細胞受損或增殖抑制有關。鼓膜上皮干細胞的分布與鼓膜的血供豐富的區(qū)域一致。

鼓膜上皮干細胞高表達 β1整合素，有很強的黏附型，對Ⅳ型膠原的黏附鼻其他細胞更快、更強。

細胞特性：

1）組織來源于實驗動物的正常鼓膜組織。

2)細胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

小鼠鼓膜上皮干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)

產品信息：

英文名稱：Primary mouse tympanic epithelial stem cells

組織來源：鼓膜組織

默認種屬 小鼠

產品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞培養(yǎng)操作：

1. 細胞復蘇

運輸與接收：細胞以液氮凍存形式運輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細胞瓶，置于超凈臺內無菌操作。

復蘇操作：將細胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。

2. 細胞傳代

傳代時機：當細胞密度達80%匯合度時進行傳代。

操作步驟：

棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細胞變圓脫落。

加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細胞完全脫落。

離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。

按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。

換液頻率：每2-3天換液一次。

3. 細胞凍存

凍存液：使用無血清凍存液。

凍存步驟：細胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉入液氮長期保存。

公司正在出售的產品：

高度生理相關性：保留了體內來源組織的結構、功能和基因表達特征。

有限壽命：與無限增殖的腫瘤細胞系不同，原代細胞增殖能力有限，經過一定次數(shù)的分裂后會進入衰老期，這更符合正常細胞的生理狀態(tài)。

異質性：初始培養(yǎng)物通常是多種細胞類型的混合物，有時需要通過差速貼壁等方法進行純化。

操作要求高：對培養(yǎng)環(huán)境、試劑質量和無菌操作的要求極為嚴格，培養(yǎng)難度大于永生化細胞系。