Recombinant Human POLD4
Recombinant Human POLD4（人重組DNA聚合酶δ亞基4蛋白）是一種在大腸桿菌中表達的高純度重組蛋白，作為DNA聚合酶δ的輔助亞基，參與DNA復制與修復過程，在基因組穩(wěn)定性維持及癌癥放射治療敏感性研究中具有重要作用。
商品介紹：
A-01K102470-50μg | Recombinant Human POLD4 |
A-01K102470-200ug | Recombinant Human POLD4 |
A-01K102470-1mg | Recombinant Human POLD4 |
別稱：DNA polymerase delta smallest subunit p12, DNA polymerase subunit delta 4, DNA polymerase subunit delta p12, p12, POLD 4, POLDS, Polymerase (DNA directed) delta 4
標簽：N-terminal His Tag
種屬：Human
宿主：E.Coli
表達區(qū)間：1-107
分子量：11.7 kDa
Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用：Western Blot, ELISA
性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
檢測原理詳解：
包被抗體結合
實驗開始前，微孔板已預先包被抗人白脂素單克隆抗體。當加入待測樣本后，
樣本中的人白脂素（Asprosin）會與固相載體上的捕獲抗體特異性結合。
形成“夾心復合物”
洗滌去除未結合物質后，加入生物素標記的檢測抗體，該抗體與白脂素分子的另一表位結合，
形成“固相抗體—抗原—檢測抗體”三明治結構。
酶促顯色反應
隨后加入?辣根過氧化物酶（HRP）標記的鏈霉親和素，與生物素檢測抗體結合。
最后加入TMB顯色底物，在HRP催化下產生藍色產物，反應終止后變?yōu)辄S色。
濃度定量分析
黃色深淺與樣本中白脂素含量成正比，通過酶標儀在450nm波長處測定吸光度（OD值），
并根據(jù)標準曲線計算出樣本中白脂素的濃度。
公司正在出售的產品：
含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體 | PE標記人CD24單克隆抗體 |
主導控制樣蛋白3抗體 | 胱抑素C單克隆抗體（包被抗體） |
維生素D結合蛋白抗體 | 細菌葡萄糖酵解溴百里酚藍（BTB）瓊脂平板 |
磷酸二酯酶8B抗體 | 酵母腺苷脫氨酶（ADA）定量檢測試劑盒 |
組織PKG-I激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | PAR-2蛋白表達西方雜交分析試劑盒 |
血液抗凝液 | 細胞糖原酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒 |
細胞染色質免疫沉淀分析（CHIP）完全試劑盒（包括抗體） | β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶6抗體 |
細胞ERK1/2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | KYNU蛋白抗體 |
重組腺病毒包裝試劑盒 | FAM98A蛋白抗體 |
冰凍切片組織ER BETA 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 | 腦腸肽受體抗體 |
通用型亮（leucine）含量比色法定量檢測試劑盒 | Recombinant Human POLD4?蛋白磷酸酶2調節(jié)亞基2D抗體 |
細胞WNV（WEST NILE）病毒定性檢測試劑盒 | 己糖6磷酸脫氫酶抗體 |
Recombinant Human RANKL | Recombinant Human TMEM149 |
實驗步驟：
1. 基因克隆與表達載體構建
從人類FBN1基因C端序列中擴增Asprosin編碼片段（約140aa）。
將目的片段插入原核表達載體，確保帶有?N端或C端His標簽，便于后續(xù)純化。
轉化至?感受態(tài)細胞，篩選陽性克隆并測序驗證。
2. 重組蛋白誘導表達
取陽性菌落接種于LB培養(yǎng)基（含氨芐青霉素），37℃振蕩培養(yǎng)過夜。
次日按1:100比例轉接至新鮮LB培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)至OD600達0.6–0.8。
加入IPTG至終濃度0.1–1.0 mM，16–25℃誘導表達6–12小時（低溫誘導有助于可溶性達）。
4℃、8000×g離心10分鐘收集菌體，棄上清，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
3. 菌體裂解與蛋白提取
將菌體沉淀重懸于裂解緩沖液（如PBS + 1% Triton X-100 + 蛋白酶抑制劑），超聲破碎
（冰浴條件下，每次30秒，共6–10次，功率30%）。
4℃、12000×g離心20分鐘，收集上清（可溶性蛋白）或沉淀（包涵體蛋白）。
若為包涵體蛋白，需用?洗滌緩沖液（含2M尿素的PBS）洗滌2–3次，去除雜蛋白。
4. 親和層析純化（Ni-NTA法）
將含His標簽的蛋白溶液（或溶解后的包涵體蛋白，使用含6–8M尿素的緩沖液溶解）上樣至?Ni-NTA親和層析柱。
用?洗滌緩沖液（含20–40mM咪唑）洗去非特異性結合蛋白。
用?洗脫緩沖液（含250–500mM咪唑）梯度洗脫目標蛋白，收集洗脫峰。
透析去除尿素與咪唑（使用PBS或生理緩沖液，4℃過夜，更換3次）。
5. 蛋白復性（針對包涵體蛋白）
若蛋白以包涵體形式表達，需在純化后進行?梯度復性：
將變性蛋白緩慢加入含?梯度降低尿素（6M → 4M → 2M → 0M）的復性緩沖液中，4℃攪拌過夜。或采用?透析法?逐步去除變性劑。復性后再次離心取上清，檢測蛋白活性。
關鍵字： POLD4;Human;E.Coli;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)是一家化學、生化和材料科學等領域的科研用研發(fā)產品的制造商和供應商， 我們的產品在相當寬的基礎科學領域得到廣泛的應用?？蛻舭▽W術界、工業(yè)界和政府的研究和開發(fā)實驗室以及制藥，生物技術，化工/石化行業(yè)等具商業(yè)規(guī)模的企業(yè)。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)除包括化學、分析化學、生命科學和材料科學阿凡提(affandi)產品線外。 質量是所有產品和服務最關鍵的組成部分，我們通過質量和實力贏得客戶的信賴。產品的質量是企業(yè)的生命。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)是一個值得信賴的，以服務為導向的公司。產品質量是我們的立身之本， 但提供給客戶的遠不止產品本身，現(xiàn)貨庫存、包裝、應急反應、客戶的技術支持等等因素能滿足和超越您的期望對我們是同樣重要的。我們建立的質量管理流程保證 了高水準的服務和不斷追求完美的承諾。對于大多數(shù)目錄產品庫存，可保證當天或第一時間發(fā)貨，我們也逐漸建立一支業(yè)務精煉、服務周到的客服隊伍，把滿足客戶的 需求作為自己的工作宗旨，運用各種方式來滿足客戶的需求，服務滲透到售前、售中、售后，甚至延伸產品本身之外，我們爭取做到出售的不再是簡單的產品，而是服務。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、 華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學，暨南大學，南京工業(yè)大學，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。
本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒； 另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。