Recombinant Human ZNHIT1

商品介紹：

別稱：CG1I, CGBP1, Cyclin G1 binding protein 1, p18 Hamlet, Zinc finger HIT domain containing protein 1, Zinc finger protein subfamily 4A member 1, zinc finger, HIT type 1, ZNFN4A1

標(biāo)簽：N-terminal His Tag

種屬：Human

宿主：E.Coli

表達(dá)區(qū)間：1-154

分子量：16.8 kDa

                 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

應(yīng)用：Western Blot, ELISA

性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

純度：Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存儲(chǔ):-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

商品概述：

Recombinant Human ZNHIT1（重組人ZNHIT1蛋白）是一種在大腸桿菌中表達(dá)的高純度重組蛋白，作為含有組氨酸三聯(lián)體（HIT）結(jié)構(gòu)域的染色質(zhì)重塑因子，主要用于研究其在組蛋白變體交換、p53依賴性轉(zhuǎn)錄調(diào)控及腫瘤抑制中的分子機(jī)制。

重組蛋白的制備流程：

重組蛋白的制備流程主要包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：

1.基因獲取：從生物體中提取目的基因，可通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增特定DNA片段，也可以人工合成基因序列，確保所獲取的基因能編碼目標(biāo)重組蛋白。

2.載體構(gòu)建：將獲取的目的基因與合適的載體連接，常見(jiàn)載體有質(zhì)粒、噬菌體等。載體需具備復(fù)制原點(diǎn)、篩選標(biāo)記等元件，使目的基因能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定復(fù)制和表達(dá)。

3.宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)化：把構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞，如大腸桿菌、酵母細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等。轉(zhuǎn)化方法有化學(xué)轉(zhuǎn)化法、電穿孔法等。

4.篩選與鑒定：運(yùn)用抗生素篩選、PCR鑒定、測(cè)序等方法，挑選出含有重組載體的陽(yáng)性克隆細(xì)胞。

5.蛋白表達(dá)：優(yōu)化培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)陽(yáng)性克隆細(xì)胞表達(dá)重組蛋白。根據(jù)宿主細(xì)胞類型和蛋白特性，調(diào)整溫度、誘導(dǎo)劑濃度等參數(shù)。

6.蛋白純化：采用親和層析、離子交換層析、凝膠過(guò)濾等方法，從細(xì)胞裂解液或培養(yǎng)液中分離純化重組蛋白。

7.質(zhì)量檢測(cè)：對(duì)純化后的重組蛋白進(jìn)行純度、活性、分子量等檢測(cè)，確保其符合質(zhì)量要求。

公司正在出售的產(chǎn)品：

收到產(chǎn)品后的處理：

離心收集：重組蛋白通常以凍干粉形式提供。在運(yùn)輸過(guò)程中，粉末可能會(huì)粘附在管壁或管蓋上。因此，在開(kāi)蓋前，務(wù)必先進(jìn)行短暫離心（例如 10,000-12,000 rpm，30秒），將凍干粉收集于管底。

復(fù)溶操作

選擇合適的溶劑：

仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照推薦的溶劑和濃度進(jìn)行復(fù)溶。

通常使用無(wú)菌的 PBS 緩沖液或低鹽緩沖液（如 10 mM Tris, pH 8.0）。

切勿使用純水，因?yàn)槿狈彌_能力和合適的離子強(qiáng)度可能導(dǎo)致蛋白沉淀或失活。

輕柔混勻：

向凍干粉中加入推薦體積的溶劑，用移液器槍頭輕輕吹打或緩慢上下顛倒混勻。

絕對(duì)禁止渦旋震蕩，因?yàn)閯×业募羟辛?huì)破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致其變性失活。

如果蛋白難以溶解，可將其置于 4℃ 靜置 2 小時(shí)以上或在水平搖床上低速搖晃。

達(dá)到推薦濃度：

初次復(fù)溶時(shí)，建議將蛋白濃度配制在說(shuō)明書(shū)推薦的范圍內(nèi)（通常不低于 100 μg/mL），這有助于維持蛋白的穩(wěn)定性。