基本信息?

?英文名稱?：dATP (100mM)
作用機(jī)制：一種高濃度的脫氧腺苷三磷酸，是DNA合成的基本原料之一，在DNA聚合酶的作用下，可連接到DNA鏈的3'末端，參與DNA鏈的延伸。 

適用樣本：PCR擴(kuò)增、DNA測(cè)序、DNA標(biāo)記、cDNA合成等所有需要DNA合成的實(shí)驗(yàn)體系，可單獨(dú)添加到反應(yīng)體系中，補(bǔ)充dATP的含量。
產(chǎn)品概述
這是一種濃度為100mM的脫氧腺苷三磷酸（dATP）溶液，是DNA合成的重要前體物質(zhì)之一。它經(jīng)過高純度合成工藝制備，嚴(yán)格去除DNA酶、RNA酶及內(nèi)毒素污染，確保PCR、qPCR、DNA測(cè)序、cDNA合成等核酸合成類實(shí)驗(yàn)的高效性與忠實(shí)性。產(chǎn)品可在-20℃長期保存，使用時(shí)無需單獨(dú)配制，直接按實(shí)驗(yàn)要求的濃度加入反應(yīng)體系即可，是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的基礎(chǔ)試劑。
產(chǎn)品特點(diǎn)
高純度原料：純度≥99%，無DNase、RNase和內(nèi)毒素污染

DNA合成底物：作為DNA合成的前體物質(zhì)，為PCR、測(cè)序等實(shí)驗(yàn)提供原料

穩(wěn)定性保障：-20℃可長期保存，反復(fù)凍融不易降解

濃度適配：100mM高濃度，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋使用
核心PCR試劑及使用方法

1. Taq DNA聚合酶

作用：催化DNA鏈的延伸，是PCR反應(yīng)的核心酶

使用方法：

通常按0.5-2U/25μL體系添加，具體用量參照試劑說明書

酶對(duì)溫度敏感，需在冰上操作，避免反復(fù)凍融

最后加入酶液，防止提前激活導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增

2. dNTP混合液

作用：提供DNA合成的原料（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）

使用方法：

終濃度一般為200μmol/L每種dNTP，總濃度800μmol/L

避免反復(fù)凍融，可分裝成小體積儲(chǔ)存

注意pH值，過酸或過堿會(huì)抑制聚合酶活性

3. PCR緩沖液

作用：提供酶促反應(yīng)的適宜環(huán)境（pH、離子濃度）

使用方法：

通常為10×濃度，使用時(shí)稀釋至1×終濃度

含Mg2+的緩沖液需注意Mg2+濃度，一般1.5-2.5mmol/L為最優(yōu)范圍

部分緩沖液含KCl、Tris-HCl等成分，無需額外添加

4. 引物（上游/下游）

作用：定位擴(kuò)增區(qū)域，引導(dǎo)DNA合成起始

使用方法：

終濃度一般為0.1-1μmol/L，根據(jù)引物Tm值調(diào)整

引物需用TE緩沖液或無菌水溶解，濃度計(jì)算準(zhǔn)確

避免引物降解，-20℃分裝儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融

5. 模板DNA

作用：提供擴(kuò)增的原始DNA模板

使用方法：

模板濃度一般為1ng-1μg/25μL體系，根據(jù)模板類型調(diào)整

基因組DNA需充分純化，避免蛋白、RNA等雜質(zhì)污染

質(zhì)粒DNA可適當(dāng)減少用量，一般10-100ng即可

公司正在出售的產(chǎn)品

實(shí)驗(yàn)流程

反應(yīng)體系配制：按1×工作濃度混合預(yù)混液、模板（10-100 ng）、引物（0.2-0.5 μM）及無核酸酶水。

PCR程序：

預(yù)變性：95℃ 30 sec

擴(kuò)增循環(huán)（40×）：95℃ 5 sec → 60℃ 30 sec（熒光采集）

熔解曲線分析：60-95℃梯度升溫。

注意事項(xiàng)

避免反復(fù)凍融，推薦分裝保存。

熔解曲線需呈現(xiàn)單一峰以確保擴(kuò)增特異性。

若需絕對(duì)定量，建議配套標(biāo)準(zhǔn)品使用。