基本信息?
產(chǎn)品名稱 | Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul) | 貨號 | P-PR1238 |
規(guī)格 | 1600U、16KU | 用途 | 僅供科研 |
?英文名稱?：Bst 2.0 DNA Polymerase (8U/ul)
作用機制：具有較強的鏈置換活性，無需高溫變性，在恒溫條件下（如60-65℃）即可解開雙鏈DNA，以單鏈DNA為模板，從引物起始合成新的DNA鏈，同時置換下游的互補鏈，常用于環(huán)介導(dǎo)等溫擴增（LAMP）等等溫擴增技術(shù)。
適用樣本：適用于等溫擴增實驗，可檢測微生物、動植物組織、臨床樣本等各類樣本中的核酸，尤其適用于現(xiàn)場快速檢測、缺乏PCR儀的實驗場景。
產(chǎn)品概述
一種具有強鏈置換活性的DNA聚合酶，源自嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillus stearothermophilus）DNA聚合酶的改良版本，無5'-3'核酸外切酶活性。該酶在恒溫條件下即可高效催化DNA合成，適用于環(huán)介導(dǎo)等溫擴增（LAMP）、滾環(huán)擴增（RCA）等等溫核酸擴增技術(shù)，以及DNA測序、分子克隆等實驗，8U/ul的濃度保證了其高效的催化活性。
產(chǎn)品特點
強鏈置換活性：高效置換DNA鏈，適用于等溫擴增技術(shù)（LAMP、RCA等）
無5'-3'外切酶活性：不降解DNA片段末端，保證產(chǎn)物完整性
恒溫擴增：最適反應(yīng)溫度65℃，無需熱循環(huán)，實驗設(shè)備要求低
高活性濃度：8U/ul的濃度，確保高效催化DNA合成
操作步驟
一、實驗前準備
向漂洗液1中加入60mL無水乙醇，向漂洗液2中加入45mL無水乙醇，充分混勻后標記
載體RNA溶液配制：向300μg載體RNA凍干粉中加入300μL無酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分裝后-20℃保存
將冷凍樣本置于室溫解凍，輕輕顛倒混勻后備用
二、手工提取流程
樣本裂解：取200μL血液樣本至1.5mL離心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解緩沖液，振蕩混勻10秒，室溫孵育10分鐘（每3分鐘顛倒混勻1次）
磁珠結(jié)合：加入15μL磁珠懸浮液（使用前充分振蕩混勻），振蕩混勻10秒，室溫孵育10分鐘（每3分鐘顛倒混勻1次）
磁珠分離：將離心管置于磁力架上，靜置1-2分鐘至磁珠完全吸附，小心吸棄上清液（避免觸碰磁珠）
洗滌純化：
取下離心管，加入500μL漂洗液1，振蕩混勻1分鐘，再次置于磁力架上分離磁珠，吸棄上清
重復(fù)上述操作1次
加入500μL漂洗液2，振蕩混勻1分鐘，置于磁力架上分離磁珠，吸棄上清
重復(fù)上述操作1次
干燥磁珠：保持離心管在磁力架上，室溫晾干5-10分鐘（確保乙醇完全揮發(fā)，避免過度干燥）
核酸洗脫：加入100-200μL洗脫緩沖液，振蕩混勻后56℃孵育5分鐘，置于磁力架上分離磁珠，上清液即為提取的核酸
公司正在出售的產(chǎn)品
羊邊界病病毒RT-PCR試劑盒 | 犬PCR檢測試劑盒 |
產(chǎn)毒副溶血弧菌PCR試劑盒 | 衣原體蛋白mei樣活性因子ELISA試劑盒 |
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α-內(nèi)肽ELISA試劑盒 | Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)脂肪細胞脂肪suan結(jié)合蛋白ELISA試劑盒 |
CCAAT增強子結(jié)合蛋白γELISA試劑盒 | A組鏈球菌菌壁多糖抗體ELISA試劑盒 |
β淀粉樣前體蛋白ELISA試劑盒 | CD22分子ELISA試劑盒 |
注意事項
實驗操作需在潔凈環(huán)境中進行，佩戴手套、口罩，避免樣本交叉污染
蛋白酶K需-20℃保存，使用時避免反復(fù)凍融，可分裝后使用
還原劑需現(xiàn)用現(xiàn)加，避免長時間暴露于空氣中失效
若毛囊樣本角質(zhì)化嚴重，可適當延長孵育時間或增加還原劑用量
提取的DNA可置于-20℃長期保存，短期可在4℃儲存
若需提高DNA產(chǎn)量，可將洗脫液重復(fù)洗脫一次吸附柱
關(guān)鍵字： Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul;Bst 2.0 DNA Polymera;
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