【產(chǎn)品介紹】
EvaBio? DNA Transfection Reagent II 是一款高性能、高品質的通用型基因轉染試劑 ,既 可用于傳送質粒 DNA ,又具有較強的 RNA 轉染能力。與其它轉染試劑相比 , 具有不受血清影響、 轉染效率高 ,細胞毒性低、操作便捷 ,結果穩(wěn)定可重復性等優(yōu)點。
【質粒DNA的轉染步驟】 以24孔板為例, ① 細胞接種: 每 孔 接 種0.5~1.0 ×10 5個細胞 ,細胞培養(yǎng) 12~24小時 ,使轉染時細胞密 度達到60~70%融合度; ② 質粒DNA/SiRNA稀釋: 將0.5μg的質粒DNA(或15pmol siRNA)加入到Opti-MEM培養(yǎng) 基中 ,稀釋后的終體積為10μL ③ 轉染試劑稀釋: 取1μL的EvaBio? DNA Transfection Reagent II(ET0303) 加入到 9μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中 ,稀釋后的終體積為10μL; ④ 復合物制備:將上述質粒DNA(或siRNA)稀釋液和轉染試劑稀釋液混合 ,輕輕吹打均勻后 ,室溫靜置10分鐘 ⑤ 將上述20μL復合物加入到24孔板中 ,輕輕吹打混勻 ,繼續(xù)培養(yǎng)18~48小時后檢測轉染 效率 ,無需更換培養(yǎng)基。
質粒DNA和siRNA的轉染優(yōu)化: 可 通 過 改 變 細 胞 密 度 、DNA/siRNA 濃 度 以 及 EvaBio ? DNA Transfection Reagent II(E T0303)濃度對轉染進行優(yōu)化。保證細胞融合度在60%以上,EvaBio? DNA Transfection Reagent II(ET0303)(μL): DNA (μg)可以在1:1和5:1之間調(diào)整 ;EvaBio ? DNA Transfection Reagent II ( ET0303 )(μL): siRNA (pmol)可 以 在0.02:1和0.15:1之間調(diào)整;
【儲存條件及保質期】 2-8℃保存 ,有效期12個月
不同培養(yǎng)板所需轉染試劑和DNA的用量
【適用范圍】 EvaBio? DNA Transfection Reagent II 轉染試劑可適用于眾多較難轉染細胞株的質粒 DNA/siRNA的轉染。適用于多種貼壁細胞 ,特別適用于各種較難轉細胞如L929、 NIH3T3 、MCF-7和A549等 ,均可得到較高的轉染效率 ,且重復性好。
【注意事項】 1.本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用 ,不得用于臨床診斷、治療等領域。 2.細胞狀態(tài):使用健康、低代數(shù)的細胞 ,狀態(tài)差會顯著降低轉染效率。 3. 無菌操作:全程在超凈臺內(nèi)操作,避免污染。 4. 試劑保存:轉染試劑需 2-8℃或-20℃避光保存** ,避免反復凍融。 5. 血清影響:部分轉染試劑需在無血清條件下進行 ,轉染后可補加血清。 6. 毒性控制:若細胞死亡明顯 ,可減少試劑用量或縮短復合物作用時間
伊娃(蘇州)生物科技有限公司
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晨曦