【產(chǎn)品介紹】 EvaBio? mRNA Transfection Reagent II 是一款體內(nèi)專用型基因轉(zhuǎn)染試劑，可通過肌肉注射 的方式將mRNA遞送傳送至體內(nèi)并在注射部位高效表達目的蛋白。與其它mRNA專用體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑相 比 ，具有操作便捷、體內(nèi)毒性低、穩(wěn)定性好、體內(nèi)轉(zhuǎn)染效率及蛋白表達量高等優(yōu)點。 【體內(nèi)轉(zhuǎn)染步驟】 以體重20g小鼠，mRNA注射器10ug為例，參考表1調(diào)整，步驟如下： ① 試劑準備: 按照表1用量首先取30ul EvaBio? mRNA Transfection Reagent II (ET0503)放 置于樣品管中； ② 復(fù)合物制備: 取10ul的mRNA (濃度為1ug/ul)與轉(zhuǎn)染試劑進行直接復(fù)合 ③ 20min:室內(nèi)靜置20分鐘 ④ 補加葡萄糖注射液：取80ul的葡萄糖注射液加入到上面復(fù)合物溶液中， ⑤ 通過肌肉注射的方式 ，注射于鼠體內(nèi) ，6-24小時后檢測mRNA在鼠體內(nèi)的蓄積或表達。 體內(nèi)轉(zhuǎn)染條件的優(yōu)化: 可通過改變mRNA的用量和濃度以及EvaBio? mRNA Transfection Reagent II 濃度對體內(nèi)分 布或蛋白表達情況進行優(yōu)化。EvaBio? mRNA Transfection Reagent II (μL): mRNA(μg)可以在4:1 和2:1之間調(diào)整。根據(jù)鼠體重的不同 ，葡萄糖注射液的補加體積可以在推薦量±30μL之間調(diào)節(jié)。優(yōu)化方 法參考表2。使用熒光標記mRNA的活體分布實驗，建議在注射后4-6小時開始檢測 ，熒光素酶標記 mRNA的活體分布實驗 ，建議在注射后6小時開始檢測。

表1.不同體重鼠的體內(nèi)用量推薦

表2.體重20g鼠的優(yōu)化復(fù)合方式推薦

【儲存條件及保質(zhì)期】 2-8℃保存 ，有效期12個月 【適用范圍】 EvaBio? mRNA Transfection Reagent II 轉(zhuǎn)染試劑可被應(yīng)用于mRNA疫苗研發(fā)或基因治療等相 關(guān)工作的研究中。可用于遞送熒光標記的mRNA或具有特殊功能的mRNA，并在體內(nèi)高效表達?？蓾M 足基礎(chǔ)科研、初期工藝開發(fā)及臨床前實驗研究使用。 【注意事項】 1.本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用 ，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。 2.細胞狀態(tài)：使用健康、低代數(shù)的細胞 ，狀態(tài)差會顯著降低轉(zhuǎn)染效率。 3. 無菌操作：全程在超凈臺內(nèi)操作，避免污染。 4. 試劑保存：轉(zhuǎn)染試劑需 2-8℃或-20℃避光保存** ，避免反復(fù)凍融。 5. 血清影響：部分轉(zhuǎn)染試劑需在無血清條件下進行 ，轉(zhuǎn)染后可補加血清。 6. 毒性控制：若細胞死亡明顯 ，可減少試劑用量或縮短復(fù)合物作用時間