基本信息?
?中文名稱?：中大量血液RNA提取試劑盒
貨號(hào)：P-PR1459
規(guī)格：40T、80T
?英文名稱?：Medium-to-large Scale Blood RNA Extraction Kit
作用機(jī)制：針對(duì)大體積血液樣本，采用紅細(xì)胞裂解液去除紅細(xì)胞，保留白細(xì)胞；用含胍鹽的裂解液破碎白細(xì)胞，釋放總RNA；結(jié)合硅膠膜離心柱或磁珠技術(shù)，高效吸附RNA并去除血紅蛋白、DNA等雜質(zhì)，洗脫后獲得微克級(jí)高完整性總RNA，滿足測(cè)序、芯片分析等下游需求。
適用樣本：人/動(dòng)物大體積全血樣本（≥5ml）
產(chǎn)品概述
本試劑盒采用異硫氰酸胍-酚抽提法結(jié)合硅膠柱純化技術(shù)，可從新鮮或冷凍的全血樣本中高效提取中大量高純度總RNA。提取的RNA完整性好、純度高，無(wú)DNA和蛋白質(zhì)污染，可直接用于RT-PCR、qPCR、Northern雜交、芯片分析、高通量測(cè)序等下游實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品組成
組分名稱 規(guī)格（20次裝） 功能說(shuō)明
裂解液 500mL 裂解細(xì)胞，釋放RNA，抑制核酸酶
氯仿-異戊醇混合液 200mL 分離RNA與蛋白質(zhì)、DNA
異丙醇 300mL 沉淀RNA
75%乙醇 500mL 洗滌RNA沉淀，去除鹽離子
RNA洗脫液 100mL 溶解純化的RNA
DNase I 2mL 降解殘留的DNA雜質(zhì)
硅膠純化柱 20個(gè) 特異性吸附RNA
50mL收集管 20個(gè) 收集純化過(guò)程中的流出液
產(chǎn)品特點(diǎn)
高得率：從10-20mL全血樣本中可提取500-1500μg總RNA，滿足大量實(shí)驗(yàn)需求
高純度：OD???/OD???比值在1.9-2.1之間，無(wú)DNA和蛋白質(zhì)污染
完整性好：提取的RNA可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)到清晰的28S和18S條帶
操作便捷：整個(gè)提取過(guò)程約2.5小時(shí)，無(wú)需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)操作
操作步驟
樣本處理：取10-20mL新鮮全血樣本，加入等體積的裂解液，充分混勻，室溫靜置10分鐘
相分離：加入0.2倍體積的氯仿-異戊醇混合液，劇烈震蕩15秒，室溫靜置3分鐘，4℃下12000g離心15分鐘
RNA沉淀：將上層水相小心轉(zhuǎn)移至新離心管，加入等體積的異丙醇，充分混勻，-20℃靜置30分鐘，4℃下12000g離心15分鐘，棄上清
RNA洗滌：加入10mL預(yù)冷的75%乙醇，輕輕洗滌RNA沉淀，4℃下8000g離心5分鐘，棄上清，重復(fù)洗滌一次
干燥溶解：室溫干燥RNA沉淀5-10分鐘，加入500-1000μL RNA洗脫液，65℃水浴10分鐘，充分溶解RNA
DNA去除：向RNA溶液中加入DNase I，37℃水浴30分鐘，降解殘留的DNA雜質(zhì)
RNA純化：將處理后的RNA溶液通過(guò)硅膠純化柱，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)完成后續(xù)的結(jié)合、洗滌和洗脫步驟，獲得高純度總RNA
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)全程需佩戴無(wú)RNA酶的手套和口罩，使用無(wú)RNA酶的耗材，避免RNA酶污染
樣本需新鮮處理或-80℃低溫保存，避免RNA降解
裂解液和氯仿-異戊醇混合液具有刺激性，操作時(shí)需在通風(fēng)櫥中進(jìn)行
干燥RNA沉淀時(shí)避免過(guò)度干燥，否則會(huì)導(dǎo)致RNA難以溶解
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關(guān)鍵字： 中大量血液RNA提取試劑盒;Medium-to-large Scal;
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