基本信息?
?中文名稱?：唾液RNA提取試劑盒（中量）
貨號(hào)：P-PR1476
規(guī)格：50T、100T
?英文名稱?：Saliva RNA Extraction Kit (Medium Scale)
作用機(jī)制：從唾液樣本中富集口腔脫落細(xì)胞，裂解細(xì)胞釋放RNA，去除唾液中的酶類和雜質(zhì)，保護(hù)RNA的完整性，可中量提取RNA，滿足后續(xù)大規(guī)模實(shí)驗(yàn)需求。
適用樣本：人類唾液樣本。
產(chǎn)品概述
本試劑盒專為唾液樣本設(shè)計(jì)，采用硅基質(zhì)吸附柱結(jié)合獨(dú)特緩沖液系統(tǒng)，可從中量唾液樣本中高效提取總RNA。提取的RNA純度高、完整性好，能有效去除基因組DNA、蛋白、雜質(zhì)等抑制劑，可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、二代測(cè)序等下游分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。整個(gè)操作流程簡(jiǎn)便快速，可在1小時(shí)內(nèi)完成批量樣本處理。
產(chǎn)品組成
組分名稱 規(guī)格 保存條件
裂解液 LB 100ml 室溫（15~30℃）
去蛋白液 PL 60ml 室溫（15~30℃）
漂洗液 W* 54ml 室溫（15~30℃）
RNase-Free 水 26ml -20℃冷凍保存
RNA 吸附柱及收集管 50套 室溫（15~30℃）
RNase-Free 離心管（2ml） 50個(gè) 室溫（15~30℃）
注：首次使用前需在漂洗液W中加入4倍體積無(wú)水乙醇，充分混勻后使用
產(chǎn)品特點(diǎn)
高效專一吸附：采用新型硅基質(zhì)材料，可特異性結(jié)合RNA，最大限度去除蛋白、雜質(zhì)等雜質(zhì)
DNA污染控制：通過(guò)優(yōu)化裂解體系和吸附條件，有效避免基因組DNA污染，無(wú)需額外DNase I消化
高得率高純度：A260/A280比值可達(dá)1.8-2.0，RNA完整性好，可直接用于各種下游實(shí)驗(yàn)
操作簡(jiǎn)便快速：無(wú)需酚氯仿抽提，整個(gè)提取流程僅需約1小時(shí)，可同時(shí)處理多個(gè)樣本
安全無(wú)毒：不含有毒有機(jī)溶劑，實(shí)驗(yàn)過(guò)程更安全環(huán)保
樣本適用性廣：適用于新鮮、冷凍或保存于唾液保存液中的唾液樣本
操作步驟
一、樣本預(yù)處理
取1mL唾液樣本轉(zhuǎn)移至2mL RNase-free離心管中
加入2mL裂解液LB，反復(fù)吹打并劇烈振蕩混勻
加入400μL氯仿（自備），劇烈振蕩15秒充分混勻
4℃，12,000rpm離心10分鐘，使樣本分層
吸取上層水相（約1.2mL）轉(zhuǎn)移至新的2mL RNase-free離心管中
二、RNA提取純化
將RNA吸附柱套入2mL收集管中，備用
向上層水相中加入1.2mL去蛋白液PL，充分混勻
將混合液分兩次全部加入RNA吸附柱中，12,000rpm離心30秒，棄廢液
向吸附柱中加入500μL漂洗液W*，12,000rpm離心30秒，棄廢液
重復(fù)步驟4一次
將吸附柱放回收集管，12,000rpm空柱離心2分鐘，徹底去除殘留漂洗液
將吸附柱轉(zhuǎn)移至新的2mL RNase-free離心管中，在吸附膜中央加入60-100μL RNase-Free水
室溫放置2分鐘，12,000rpm離心1分鐘，收集濾液即為RNA溶液
注意事項(xiàng)
RNase污染預(yù)防：
使用無(wú)RNase的塑料制品和槍頭，避免交叉污染
操作人員需佩戴一次性口罩和手套，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中勤換手套
所有溶液配制需使用RNase-free水
樣本處理：
樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)影響RNA完整性和得率
唾液樣本需充分混勻后再進(jìn)行提取，建議使用渦旋振蕩器混勻
試劑使用：
首次使用前務(wù)必在漂洗液W*中加入4倍體積無(wú)水乙醇
裂解液LB和去蛋白液PL含有刺激性物質(zhì)，操作時(shí)需注意防護(hù)
如發(fā)現(xiàn)試劑有析出或渾濁，可37℃溫浴復(fù)溶至澄清后使用
各試劑使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中
離心操作：
所有離心步驟均在室溫完成，使用可達(dá)到12,000rpm轉(zhuǎn)速的臺(tái)式離心機(jī)
確保離心過(guò)程中離心管蓋緊，避免液體滲漏
RNA保存：
提取的RNA可立即用于下游實(shí)驗(yàn)，或分裝后置于-80℃長(zhǎng)期保存
避免RNA樣本反復(fù)凍融，建議按需分裝保存
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關(guān)鍵字： 唾液RNA提取試劑盒（中量）;Saliva RNA Extractio;
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