基本信息?
產(chǎn)品名稱 | pUC57 Simple TA/平端通用克隆載體 | 貨號 | P-PR1322 |
規(guī)格 | 20T | 用途 | 僅供科研 |
?英文名稱?:pUC57 Simple TA/Blunt-End Universal Cloning Vector
作用機(jī)制:一種高拷貝的大腸桿菌克隆載體,含有氨芐青霉素抗性基因與lacZα片段;TA克隆載體3'末端帶T尾,可與PCR產(chǎn)物(Taq酶擴(kuò)增產(chǎn)物3'末端帶A尾)直接連接;平端通用克隆載體可與平末端DNA片段連接。
適用樣本:PCR產(chǎn)物、平末端DNA片段的克隆與擴(kuò)增,適用于基因克隆、測序、表達(dá)等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品概述
pUC57 Simple TA/平端通用克隆載體是一種多功能的克隆載體,兼具TA克隆與平端克隆的能力,廣泛應(yīng)用于分子克隆實(shí)驗(yàn)。該載體基于pUC57載體骨架改造而成,具有氨芐青霉素抗性基因、復(fù)制起點(diǎn)、多克隆位點(diǎn)等基本元件,便于質(zhì)粒的篩選與擴(kuò)增。它的T載體版本末端帶有3'胸腺嘧啶(T)突出,可與PCR擴(kuò)增產(chǎn)生的3'腺苷酸(A)突出的DNA片段高效連接,實(shí)現(xiàn)TA克??;平端版本則可與平末端的DNA片段通過T4 DNA連接酶連接,實(shí)現(xiàn)平端克隆。pUC57 Simple TA/平端通用克隆載體操作簡便,克隆效率高,適用于PCR產(chǎn)物克隆、酶切產(chǎn)物克隆、基因片段保存等多種場景,為分子生物學(xué)研究中DNA片段的克隆與載體構(gòu)建提供了靈活便捷的選擇。
產(chǎn)品特點(diǎn)
雙功能載體:同時(shí)支持TA克隆與平端克隆,適配不同類型的DNA片段克隆。
高拷貝復(fù)制:載體為高拷貝質(zhì)粒,重組后質(zhì)粒提取產(chǎn)量高,每毫升菌液可提取≥50μg質(zhì)粒。
篩選標(biāo)記完善:包含氨芐青霉素抗性基因與藍(lán)白斑篩選標(biāo)記,便于陽性克隆快速篩選。
多克隆位點(diǎn)豐富:包含多種限制性內(nèi)切酶位點(diǎn),適配不同酶切片段的克隆。
操作步驟
.配制反應(yīng)體系:(以25μl體系為例)
組分 體積
10×反應(yīng)緩沖液 2.5μl
MgCl?(25mM) 1.5-2.5μl(根據(jù)模板調(diào)整)
dNTPs(10mM each) 0.5μl
上游引物(10μM) 1μl
下游引物(10μM) 1μl
模板DNA 1-5μl
3173 DNA Polymerase 0.2-0.5μl
ddH?O 補(bǔ)至25μl
.PCR擴(kuò)增:設(shè)置循環(huán)參數(shù) 95℃預(yù)變性3min;95℃變性30s,50-65℃退火30s,72℃延伸(1min/kb),25-35個循環(huán);72℃終延伸10min
.產(chǎn)物處理:擴(kuò)增產(chǎn)物需添加Loading Buffer后進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳
公司正在出售的產(chǎn)品
異尖線蟲屬PCR試劑盒 | 埃可病毒PCR檢測試劑盒 |
雞敗血支原體PCR檢測試劑盒 | 小乳腺表皮粘蛋白ELISA試劑盒 |
山茱萸染料法PCR鑒定試劑盒 | CD22分子ELISA試劑盒 |
腐敗希瓦菌PCR檢測試劑盒 | 雪腐鐮刀菌PCR試劑盒 |
金黃地鼠白血病病毒RT-PCR試劑盒 | 鯉皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒 |
人腺病毒B7型PCR試劑盒 | 斑點(diǎn)叉尾鮰病毒PCR檢測試劑盒 |
乳suan桿菌(LB)核suan檢測試劑盒 | 草魚呼腸孤病毒3型RT-PCR試劑盒 |
巨細(xì)胞病毒PCR檢測試劑盒 | 熒光sumeiPCR試劑盒 |
巨細(xì)胞病毒PCR試劑盒 | 植物源性成分PCR檢測試劑盒 |
肉毒桿菌F型(CB-F)核suan檢測試劑盒 | 布氏岡比亞錐蟲 |
解脲支原體PCR檢測試劑盒 | 布氏錐尾線蟲PCR檢測試劑盒 |
甲胎蛋白異質(zhì)體L1ELISA試劑盒 | 支氣管敗血波氏桿菌PCR試劑盒 |
胺甲基四氫葉suan環(huán)化脫氫meiELISA試劑盒 | pUC57 Simple TA/平端通用克隆載體β淀粉樣蛋白25-35ELISA試劑盒 |
嵌合蛋白1ELISA試劑盒 | cGMP依賴性蛋白激meiⅠELISA試劑盒 |
白介su1εELISA試劑盒 | Derlin3蛋白ELISA試劑盒 |
注意事項(xiàng)
試劑預(yù)處理:使用前需按照瓶身標(biāo)簽提示,向漂洗液中加入指定體積的無水乙醇
沉淀處理:若裂解液、結(jié)合緩沖液出現(xiàn)沉淀,可在37℃水浴中加熱溶解,搖勻后再使用
操作環(huán)境:實(shí)驗(yàn)需在潔凈環(huán)境中進(jìn)行,避免樣本交叉污染;所有離心步驟均在室溫下完成
試劑保存:試劑盒未開封時(shí),可在15~25℃干燥環(huán)境下保存12個月;開封后蛋白酶K需置于-20℃保存,避免反復(fù)凍融
安全防護(hù):若試劑接觸皮膚或黏膜,需立即用大量自來水沖洗
關(guān)鍵字: pUC57 Simple TA/平端通用;pUC57 Simple TA/Blun;
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