鉤端螺旋體通用染料法熒光定量PCR試劑盒

商品屬性

用途說明

本試劑盒采用染料法熒光定量PCR技術，專用于鉤端螺旋體核酸的定性或定量檢測，適用于科研用途，不可用于臨床診斷。

規(guī)格及成分

| 編號 | 成分 | 規(guī)格 | 包裝標識 |

| 試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（紅蓋） | 預混反應液 |

| 試劑二 | 超純水 | 1 mL（亮黃色蓋） | 稀釋液 |

| 試劑三 | 引物混合液 | 100 μL（白蓋） | 特異性引物 |

| 試劑四 | 陽性對照（1×10^8拷貝/μL）| 50 μL（黃蓋） | 標準品 |

| — | 使用手冊 | 1份 | 操作指南 |

技術特點

高特異性：針對鉤端螺旋體保守序列設計引物，避免交叉反應。

高靈敏度：檢測限可達數(shù)百拷貝/反應。

便捷性：即開即用，用戶僅需提供DNA模板。

防污染設計：一管式閉管檢測，減少氣溶膠污染風險。

運輸與保存

低溫運輸（-20℃），保存期限12個月。

避光保存反應液，避免反復凍融。

操作步驟

樣本準備：

在獨立區(qū)域處理樣本，使用帶濾芯槍頭避免交叉污染。

陽性對照稀釋：

按10倍梯度稀釋陽性對照（10^2~10^7拷貝/μL），每步更換槍頭并充分混勻。

PCR反應體系配制：

按20 μL體系混合各組分，避光操作。

上機檢測：

程序設置：預變性（95℃, 5 min）→ 40循環(huán)擴增（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）。

信號采集：復性/延伸階段檢測熒光（激發(fā)波長471 nm，發(fā)射波長530 nm）。

數(shù)據(jù)分析

定量檢測：以陽性對照log濃度為橫軸、Ct值為縱軸繪制標準曲線，計算樣本濃度。

定性檢測：

陰性對照Ct≥40，陽性對照Ct≤30；

樣本Ct≤35為陽性，≥40為陰性；35~40需復測確認。

注意事項

分區(qū)操作（樣本處理、試劑配制、擴增區(qū)分離）。

使用后工作臺需用10%次氯酸或75%乙醇消毒。

廢棄物按生物危害物處理，遵循《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》。

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