疏螺旋體（包柔螺旋體）通用染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 疏螺旋體（包柔螺旋體）通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Borrelia spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4544 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高特異性：針對(duì)疏螺旋體保守序列設(shè)計(jì)引物，避免交叉反應(yīng)。
高靈敏度：檢測(cè)限可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)。
便捷性：即開(kāi)即用，用戶(hù)僅需提供DNA模板。
防污染設(shè)計(jì)：一管式熒光定量PCR，減少后續(xù)污染風(fēng)險(xiǎn)。
穩(wěn)定性：-20℃保存，有效期12個(gè)月。
產(chǎn)品用途：科研使用（不可用于臨床診斷）
產(chǎn)品規(guī)格及成分
| 編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 | 包裝標(biāo)識(shí) |
| 試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL | 紅蓋 |
| 試劑二 | 超純水 | 1 mL | 亮黃色 |
| 試劑三 | 引物混合液 | 100 μL | 白蓋 |
| 試劑四 | 陽(yáng)性對(duì)照（1×10? 拷貝/μL）| 50 μL | 黃蓋 |
| — | 使用手冊(cè) | 1份 | — |
實(shí)驗(yàn)操作流程
1. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋?zhuān)ㄊ纠?02~10?拷貝/μL梯度）
步驟：
標(biāo)記6管稀釋液（編號(hào)7~2），每管加45 μL專(zhuān)用模板稀釋液。
從原液（10?拷貝/μL）開(kāi)始，逐級(jí)稀釋至10?~102拷貝/μL，每步換槍頭并充分震蕩。
稀釋后置于冰上備用。
2. PCR反應(yīng)體系配制
反應(yīng)體系：20 μL/反應(yīng)（含MagicMix、引物、模板DNA）。
避光操作，避免氣泡，管蓋需密封。
3. 熒光定量PCR程序
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 變性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |
| 信號(hào)采集 | 530 nm | — | |
4. 數(shù)據(jù)分析
定量檢測(cè)：以陽(yáng)性對(duì)照log值為橫軸、Ct值為縱軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，推算樣本濃度。
定性檢測(cè)：
陰性對(duì)照Ct≥40，陽(yáng)性對(duì)照Ct≤30。
樣本Ct≤35為陽(yáng)性，≥40為陰性；35~40需復(fù)測(cè)。
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。
防護(hù)措施：使用一次性耗材（吸頭、手套），實(shí)驗(yàn)后以10%次氯酸或75%酒精消毒臺(tái)面。
保存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
廢棄物處理：所有組分按生物污染廢棄物規(guī)范處置。
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關(guān)鍵字： 疏螺旋體（包柔螺旋體）通用;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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