兔腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞是腎臟的核心功能細(xì)胞群體,主要包括腎小球內(nèi)皮細(xì)胞、腎小球上皮細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞等。它共同構(gòu)成腎臟的濾過(guò)、重吸收與分泌功能單位,負(fù)責(zé)清除體內(nèi)代謝廢物、維持水鹽平衡與酸堿平衡。腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞損傷是各類(lèi)腎臟疾?。ㄈ缒I炎、腎衰竭)的核心病理環(huán)節(jié),因此是研究腎臟功能與疾病機(jī)制的綜合細(xì)胞模型。
產(chǎn)品名稱(chēng) 兔腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞
英文名稱(chēng):Rabbit Renal Parenchymal Cells
貨號(hào):YS-01X8429
組織來(lái)源 腎組織
種屬 兔
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介:實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶-胰蛋白酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶兔腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法,然而這種方法受到供體腎短缺的限制。腎細(xì)胞移植可部分解決供體腎短缺的問(wèn)題,是未來(lái)可以替代腎臟移植的最有效方法。因此,體外腎細(xì)胞的培養(yǎng)受到國(guó)內(nèi)外有關(guān)專(zhuān)家的密切關(guān)注。原代腎細(xì)胞作為一種常用的腎臟毒理學(xué)研究對(duì)象,其分離方法主要有機(jī)械研磨分離法和酶消化法,酶消化法因?qū)?xì)胞損傷小、分離效果好而優(yōu)于機(jī)械研磨分離法;目前常用的酶消化法主要是胰蛋白酶消化法和膠原酶消化法。

細(xì)胞組成:腎臟實(shí)質(zhì)混合細(xì)胞,含腎小管、腎小球固有細(xì)胞等混合功能細(xì)胞。
形態(tài)結(jié)構(gòu):形態(tài)多樣,上皮樣為主,混雜少量間質(zhì)梭形細(xì)胞,抱團(tuán)生長(zhǎng)。
分子標(biāo)記:廣譜腎上皮 CK 陽(yáng)性,局部表達(dá) Podocin、AQP 等特異性標(biāo)記。
功能特性:執(zhí)行腎臟濾過(guò)、重吸收、代謝排泄整體功能;適用于整體腎組織毒性、藥物腎毒性篩選。

① 綜合執(zhí)行腎臟基礎(chǔ)生理代謝、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)與毒素清除
② 參與尿液生成、電解質(zhì)調(diào)節(jié)及體內(nèi)酸堿平衡維持
③ 協(xié)同完成腎臟濾過(guò)、重吸收與分泌核心生理功能
④ 對(duì)腎毒性物質(zhì)、缺血缺氧敏感,是腎損傷核心靶細(xì)胞

1.無(wú)菌取出組織,預(yù)冷 PBS 反復(fù)沖洗,去除血跡、氣管及雜質(zhì)組織。
2.將組織剪碎至 1mm3 細(xì)小組織塊,PBS 反復(fù)漂洗,去除漂浮雜質(zhì)與死細(xì)胞。
3.加入混合消化液(胰酶 + 膠原酶),37℃水浴消化 20~30min,間斷輕柔吹打;血清培養(yǎng)基加入終止消化。
4.細(xì)胞懸液過(guò) 100μm 濾網(wǎng),收集濾液,300g 離心 5min,棄上清,PBS 重懸洗滌一次。
5.完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,調(diào)整合適密度接種于培養(yǎng)皿;置于 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
6.培養(yǎng) 24h 后首次換液,利用差速貼壁特性:成纖維細(xì)胞貼壁快,去除未貼壁上皮等雜細(xì)胞;之后每 2~3 天換液一次。

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