小鼠精原干細胞是雄性小鼠睪丸曲細精管內(nèi)的成體干細胞，具備自我更新和分化為各級生精細胞的潛能，是研究精子發(fā)生機制、生殖干細胞調(diào)控以及雄性不育治療的關(guān)鍵細胞載體。
產(chǎn)品名稱 小鼠精原干細胞

英文名稱：Mouse Spermatogonial Stem Cells

貨號：YS-01X7493

組織來源 睪丸組織

種屬 小鼠

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介：實驗室分離的小鼠精原干細胞采用先機械吹打、后胰蛋白酶消化，結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：實驗室分離的小鼠精原干細胞經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、圓形

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠精原干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠精原干細胞分離自睪丸組織；睪丸是雄性生殖器官，也叫精巢，具體結(jié)構(gòu)包括生精小管以及周圍的結(jié)締組織。生精小管也叫曲精小管、曲細精管，是睪丸上細長而彎曲的管道。精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細胞，是成體內(nèi)的定向干細胞。精原干細胞的一些獨特優(yōu)勢使其成為動物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調(diào)節(jié)機制的深入研究，精子發(fā)生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉(zhuǎn)染，異體、異種移植技術(shù)的實際應(yīng)用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi)，精子發(fā)生時一個受高度調(diào)控和持續(xù)的過程，精原干細胞(SSCs)一方面進行自我更新維持干細胞數(shù)量，另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細胞直至最后生成精子。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處，是哺乳動物精子發(fā)生的最原始細胞，也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養(yǎng)體系的建立，在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細胞，具有自我更新能力和多向分化潛能，是哺乳動物體內(nèi)唯一能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。

細胞組成：睪丸生精小管基底部位原始生殖干細胞，干性未分化細胞群

形態(tài)結(jié)構(gòu)：胞體圓形或卵圓形，體積小、核大胞質(zhì)少，染色質(zhì)致密，呈單細胞或小集落生長

分子標記：PLZF、GFRα1、CD9、Thy1、OCT4

功能特性：雄性精子發(fā)生的起源干細胞，自我更新維持干細胞庫，定向分化形成各級生精細胞，參與雄性生殖功能維持

雄性生殖干細胞，自我更新維持干細胞庫

定向分化生成各級生精細胞

參與精子發(fā)生與雄性生殖功能維持

介導(dǎo)生殖損傷修復(fù)與再生

1.無菌環(huán)境下取出組織，用預(yù)冷PBS快速沖洗2次去除表面血污，直接剪至1mm3左右小塊

2.將組織塊加入混合消化液，37℃恒溫振蕩消化20-25分鐘，期間每隔10分鐘輕輕搖晃一次

3.消化結(jié)束后，直接加入預(yù)熱的完全培養(yǎng)基終止消化，用200目細胞篩一次性過濾

4.無需離心，直接將濾液接種至預(yù)熱的包被培養(yǎng)瓶中，放入37℃、5%CO?培養(yǎng)箱

5.24小時后首次半換液，僅更換一半培養(yǎng)基，避免剛貼壁的細胞脫落

6.此后每2-3天換液一次，待細胞融合度達到80%左右時，直接用0.25%胰蛋白酶室溫消化1-2分鐘，加入培養(yǎng)基終止后輕輕吹打，按1:2比例直接傳代，無需離心收集細胞