小鼠胚胎干細(xì)胞是從小鼠早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離獲得的多能干細(xì)胞，具有無(wú)限自我更新能力與向三胚層所有細(xì)胞分化的潛能，是發(fā)育生物學(xué)研究、疾病模型構(gòu)建及再生醫(yī)學(xué)的核心工具。
產(chǎn)品名稱 小鼠胚胎干細(xì)胞

英文名稱：Mouse Embryonic Stem Cells

貨號(hào)：YS-01X7728

組織來(lái)源 囊胚

種屬 小鼠

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎干細(xì)胞采用分離囊胚組織，去除胚胎透明帶、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)，胰酶消化傳代純化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：包被條件明膠(0.1%)

培養(yǎng)基含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：短梭形、多角形

傳代特性：可傳3-5代左右

消化液：0.025%胰蛋白酶小鼠胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠胚胎干細(xì)胞分離自囊胚胚胎組織；胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cell，ESCs，簡(jiǎn)稱ES、EK或ESC細(xì)胞)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞，它具有體外培養(yǎng)無(wú)限增殖、自我更新和多向分化的特性。無(wú)論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型。進(jìn)一步說(shuō)，胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)是一種高度未分化細(xì)胞。它具有發(fā)育的全能性，能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官，包括生殖細(xì)胞。ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu)，細(xì)胞核大，有一個(gè)或幾個(gè)核仁，胞核中多為常染色質(zhì)，胞質(zhì)胞漿少，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。體外培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞排列緊密，呈集落狀生長(zhǎng)。用堿性磷酸酶染色，ES細(xì)胞呈棕紅色，而周圍的成纖維細(xì)胞呈淡黃色。細(xì)胞克隆和周圍存在明顯界限，形成的克隆細(xì)胞彼此界限不清，細(xì)胞表面有折光較強(qiáng)的脂狀小滴。細(xì)胞克隆形態(tài)多樣，多數(shù)呈島狀或巢狀。小鼠ES細(xì)胞的直徑7 微米～18 微米，豬、牛、羊ES細(xì)胞的顏色較深，直徑12 微米～18 微米。胚胎干細(xì)胞與普通細(xì)胞有顯著差別，有其特定的生長(zhǎng)特性：和特定的標(biāo)志，例如堿性磷酸酶活性非常高，帶有胚胎階段特異性表面抗原( Stage- specific embryonic antigens,SSEA)，人類胚胎干細(xì)胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標(biāo)志，這些特性和標(biāo)志均可以用于對(duì)胚胎干細(xì)胞進(jìn)行鑒定，除此之外，胚胎干細(xì)胞還可以在體外永久傳代，并保持正常核型。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子( Leukaemia inhibitory factor,LF)或者在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層(MEF)上培養(yǎng)時(shí)，胚胎干細(xì)胞都能呈克隆性增殖，長(zhǎng)期保持核型正常和穩(wěn)定，凍存解凍也不影響不分化的特性。另外，胚胎干細(xì)胞還表現(xiàn)岀高水平端粒酶活性，目前證明端粒酶與細(xì)胞衰老密切相關(guān)，多數(shù)成熟細(xì)胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細(xì)胞與成熟細(xì)胞不同的重要特點(diǎn)，也可能是其復(fù)制生命期限遠(yuǎn)比體細(xì)胞長(zhǎng)的原因。

細(xì)胞組成：小鼠囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)來(lái)源全能干細(xì)胞，未分化原始細(xì)胞群

形態(tài)結(jié)構(gòu)：圓形、胞體小，核大胞質(zhì)少，緊密抱團(tuán)形成球狀克隆，邊界清晰

分子標(biāo)記：OCT4、Sox2、Nanog、SSEA-1、AP（堿性磷酸酶陽(yáng)性）

功能特性：全能性，可無(wú)限自我更新，分化為三胚層所有組織細(xì)胞，是發(fā)育生物學(xué)、基因編輯、分化研究核心工具細(xì)胞

全能干細(xì)胞，無(wú)限自我更新、多向分化

可分化為機(jī)體各類組織功能細(xì)胞

用于發(fā)育生物學(xué)、基因編輯研究

助力再生醫(yī)學(xué)、疾病模型構(gòu)建

1.取材：新鮮組織（動(dòng)物 / 臨床），預(yù)冷 PBS 沖洗，去除血污、脂肪、包膜。

2.修剪：剪成1 mm3小塊，PBS 洗 3–5 次至澄清。

3.消化：

加 3–5 倍體積0.25% 胰酶，37℃孵育10–20 min，每 5 min 輕搖。

纖維組織換膠原酶，37℃消化 30–60 min。

4.終止：加等體積含血清培養(yǎng)基中和胰酶。

5.過(guò)濾：100 μm 篩過(guò)濾，棄未消化塊。

6.離心：300–400 g × 5 min，棄上清；PBS 重懸洗滌 1 次。

7.接種：完全培養(yǎng)基重懸，計(jì)數(shù)；按1×10?–5×10? cells/cm2接種。

8.培養(yǎng)：37℃、5% CO?；24 h 內(nèi)不動(dòng)，48–72 h 首次換液。