產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 巨細(xì)胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體 | 貨號 | YS-K7057 |
英文名稱 | HCMV pp65 Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:PP65_HCMVM; PP65_HCMVA; Cytomegalovirus pp65; 65 kDa lower matrix phosphoprotein; 65 kDa matrix phosphoprotein; 65 kDa phosphoprotein; CMV 65 kDa lower matrix phosphoprotein; CMV pp65; Cytomegalovirus 65 kDa lower matrix phosphoprotein; Cytomegalovirus pp65; HHV 5; PP65; Tegument protein pp65; Tegument protein UL83; UL83; HCMV PP65.
交叉反應(yīng):Human
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from HCMV pp65
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：65 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
PP65是巨細(xì)胞病毒（CMV）的核心低基質(zhì)磷脂蛋白，為病毒感染早期標(biāo)志性抗原，參與病毒組裝、復(fù)制與宿主細(xì)胞免疫逃逸。該抗體可特異性識別CMV-PP65蛋白的保守抗原表位，精準(zhǔn)靶向巨細(xì)胞病毒感染細(xì)胞，可用于早期檢測巨細(xì)胞病毒感染、鑒定病毒活化狀態(tài)；同時(shí)可結(jié)合病毒PP65蛋白，干擾病毒蛋白組裝與復(fù)制過程，抑制巨細(xì)胞病毒增殖，兼具感染檢測與病毒干預(yù)的雙重作用，適用于病毒感染診斷與致病機(jī)制研究。
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：PP65 是人巨細(xì)胞病毒 CMV 高豐度基質(zhì)磷蛋白，病毒裂解期大量合成，是 CMV 標(biāo)志性抗原；
核心生理功能：參與病毒核衣殼組裝、轉(zhuǎn)運(yùn)，潛伏再激活階段早期表達(dá)，為 CMV 感染診斷核心標(biāo)志物；
抗體作用特點(diǎn)：特異性結(jié)合病毒 PP65 蛋白，不結(jié)合宿主細(xì)胞內(nèi)源蛋白，適用于免疫熒光胞內(nèi)抗原染色、IHC、膠體金、ELISA，臨床用于移植患者 CMV 活動(dòng)性感染篩查。
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核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
關(guān)鍵字： 巨細(xì)胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白;Rabbit;65 kDa;
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