本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附特異性檢測原理，酶標(biāo)板固相包被巨細(xì)胞病毒（CMV）特異性抗原，待測樣本中的抗CMV IgG抗體可與固相抗原精準(zhǔn)結(jié)合；孵育洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入酶標(biāo)記抗人IgG特異性二抗結(jié)合免疫復(fù)合物，再次洗滌后加入底物顯色，顯色深淺與樣本中anti-CMV IgG抗體濃度成正比，實現(xiàn)定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG(anti-CMV IgG)ELISA試劑盒
英文名稱：anti-CMV IgG ELISA Kit
貨號：Y-E2732
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小檢出 0.05IU/mL
檢測范圍：0.1IU/mL～12.8IU/mL
反應(yīng)時間：樣本孵育 65min；二抗 35min；顯色 11min
保存條件：試劑盒 2～8℃，終止液常溫避光保存
顯色系統(tǒng)：A+B 等量混合顯色
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，可批量自動計算樣本 IgG 濃度
注意事項：溶血嚴(yán)重樣本建議棄用重采，血紅蛋白會干擾酶促顯色
通用注意事項：
樣本要求
血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。
溫度控制
孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。
避光操作
TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。
洗板規(guī)范
洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。
污染防控
實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。
安全防護(hù)
終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。
失效判定
試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。
稀釋校正
樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。
空白對照
空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。
儲存禁忌
試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：
樣本稀釋：血清 1:106 稀釋，顛倒混勻 8 次，室溫靜置 8min。
空白、陰陽性、樣本孔分別加液 100μL。
一步添加酶標(biāo)記抗人 IgG 100μL，封板輕震。
37℃避光孵育 55min。
洗板 5 次，浸泡 31s / 次。
AB 顯色液顯色 14min。
終止讀數(shù)，判斷 CMV IgG 抗體陰陽性。
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關(guān)鍵字： 人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG;anti-CMV IgG;ELISA試劑盒;
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