本試劑盒基于間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，酶標(biāo)板微孔包被風(fēng)疹病毒特異性抗原，待測(cè)樣本中的抗風(fēng)疹病毒IgG抗體與固相抗原特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合組分，加入酶標(biāo)記抗人IgG二抗孵育結(jié)合，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)精準(zhǔn)測(cè)定樣本中anti-RV IgG抗體的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱(chēng)：人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體(anti-RV IgG)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng)：anti-RV IgG ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2722
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：0.1IU/mL
檢測(cè)范圍：0.2–35IU/mL
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 75min，酶結(jié)合物 50min，顯色 14min，總 139min
保存條件：2～8℃冷藏，開(kāi)封后試劑 3 周內(nèi)用完
顯色系統(tǒng)：HRP 催化 TMB 底物顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋擬合曲線(xiàn)，＞10IU/mL 判定具備免疫力
注意事項(xiàng)：孕前篩查首選；既往感染與現(xiàn)癥感染需搭配 IgM 結(jié)果解讀
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：
1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋?zhuān)ǔＲ?jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋?zhuān)?/span>
凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；
按說(shuō)明書(shū)梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋?zhuān)瑴啙針颖?12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。
2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備
設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。
耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。
取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記
酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
血清樣本制備
靜脈血分離血清，溶血樣本直接棄用，樣本 4℃保存不超 48h，長(zhǎng)期分裝 - 20℃凍存。
試劑盒試劑稀釋平衡
所有試劑室溫放置 30min，稀釋濃縮洗滌液配制成工作洗滌液，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)品梯度加孔
風(fēng)疹 IgG 標(biāo)準(zhǔn)品溶解后梯度稀釋 6 梯度，每孔添加 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液。
一步法孵育加液
待測(cè)樣本 50μL 入孔，加入酶標(biāo)記抗人 IgG 二抗 + 風(fēng)疹抗原混合液 50μL，封板 37℃孵育 60min。
微孔洗滌流程
棄凈孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡 30s 拍干，循環(huán)洗板 5 次，防止交叉污染。
避光顯色反應(yīng)
每孔加入顯色液 A、B 各 50μL，遮光 37℃顯色 13min。
終止結(jié)果判讀
終止液終止顯色，450nm 測(cè)定吸光度，判定風(fēng)疹 IgG 抗體陰陽(yáng)性與滴度。
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關(guān)鍵字： 人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體;anti-RV IgG;ELISA試劑盒;
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