.硫酸軟骨素A(24967-93-9)的制備: (1)提取、酶解、沉淀、干燥: 稱取豬喉、鼻軟骨投入5倍量的20g/L(2%)氫氧化鈉溶液中浸泡,間歇攪拌,待浸出液達(dá)到5.5°Be時,過濾,濾渣再提取1次,合并濾液。在50℃用粗制胰酶水解,除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì),過濾至澄明,調(diào)pH6,加乙醇使醇含量達(dá)75%,靜置過夜。離心分離,沉淀用無水乙醇洗滌,于60℃干燥,得硫酸軟骨素粗品。
豬喉、鼻軟骨[20g/LNaOH]→提取液[胰酶]→[50℃]酶解液[75%乙醇]→[pH6]粗制品
(2)分級分離: 取粗品1kg加入蒸餾水20L,乙酸1L和氯化鈣500g(以無水計)的混合液中,攪拌至全溶,再加乙醇的體積分?jǐn)?shù)達(dá)50%,有沉淀析出,靜置過夜。離心,收集鈣鹽沉淀物。再溶于蒸餾水40L,乙酸1.5L和氯化鈣100g(以無水計)的混合液中,攪拌溶解,加入乙醇的體積分?jǐn)?shù)為29%,沉淀析出,離心分離(沉淀回收CSA-Ca)。上清乙醇液中,繼續(xù)加入適量乙醇,攪拌使其產(chǎn)生白色永久性混濁,靜置過夜。次日,再加適量乙醇使其濃度達(dá)39%,放置沉淀結(jié)晶7d。離心,沉淀用無水乙醇洗滌,60℃干燥,得CSA-Ca。上清乙醇液回收CSA-Ca。
粗制品[水,HAc,CaCl2,乙醇]→CSA-Ca
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