人核糖體蛋白S6激酶α5(RPS6Ka5)重組蛋白適配 S6 磷酸化激酶活性分析、翻譯起始調(diào)控、細(xì)胞應(yīng)激應(yīng)答及腫瘤增殖相關(guān)信號通路體外研究。

型號：YS-DB2542

產(chǎn)品名稱：人核糖體蛋白S6激酶α5(RPS6Ka5)重組蛋白

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Ribosomal Protein S6 Kinase Alpha 5 (RPS6Ka5)

MSK1; MSPK1; RLPK; RSKL; RSK-like protein kinase; 90 kDa ribosomal protein S6 kinase 5; Nuclear mitogen- and stress-activated protein kinase 1

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：42.5kDa

實際分子量：44kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Glu2~Phe348 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：5.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：

體外激酶活性測定：S6 底物肽磷酸化反應(yīng)，磷酸化特異性 WB 定量激酶催化活力。

底物特異性驗證：對比多種絲 / 蘇氨酸肽段磷酸化效率，確認(rèn) S6 底物偏好性。

SDS-PAGE 純度質(zhì)控：分析蛋白均一性、雜蛋白污染。

WB 蛋白身份驗證：抗體雜交確認(rèn)重組構(gòu)建無誤。
公司正在出售的產(chǎn)品：

常見實驗場景操作指南：

細(xì)胞培養(yǎng)實驗

濃度優(yōu)化：先設(shè)置預(yù)實驗梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細(xì)胞增殖、分化或信號通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。

添加時機：細(xì)胞接種后24-48小時，待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。

更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。

免疫檢測實驗

陽性對照設(shè)置：在ELISA或WB實驗中，用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，確保定量準(zhǔn)確性。

封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結(jié)合。

抗體配對：選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

蛋白相互作用實驗

標(biāo)簽選擇：若使用Pull-down實驗，優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白，便于親和層析分離。

反應(yīng)條件：在生理緩沖液（如PBS）中進(jìn)行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。

陰性對照：設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組，排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。