人核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kb1)重組蛋白用于下游核糖體底物磷酸化測(cè)定、營(yíng)養(yǎng)感知信號(hào)通路、細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)控及激酶抑制劑篩選實(shí)驗(yàn)。
型號(hào)：YS-DB15
產(chǎn)品名稱：人核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kb1)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1 (RPS6Kb1)
PS6K; S6K; S6K1; STK14A; p70(S6K)-alpha; p70-S6K; p70-alpha; P70-S6 Kinase 1; 70 kDa ribosomal protein S6 kinase 1; Serine/threonine-protein kinase 14A
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位：：n/a
預(yù)測(cè)分子量：33.2kDa
實(shí)際分子量：33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：Phe91~Phe352 with
緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性狀：凍干粉
純度：> 90%
等電點(diǎn)：-
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理：
S6 靶蛋白磷酸化酶活檢測(cè)：激酶介導(dǎo)底物絲氨酸位點(diǎn)磷酸化，通過磷酸化信號(hào)強(qiáng)弱定量酶活性。
抑制劑敏感性測(cè)試：mTOR、S6K 特異性抑制劑可下調(diào)酶活，佐證激酶分型正確性。
SDS-PAGE 電泳純度檢測(cè)：判定蛋白純度與完整度。
免疫印跡鑒定：標(biāo)簽抗體驗(yàn)證重組蛋白表達(dá)正確。
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復(fù)溶操作要點(diǎn)：
復(fù)溶前準(zhǔn)備
工具消毒：移液槍頭、離心管需經(jīng)過高壓滅菌或一次性無菌處理，避免引入污染。
緩沖液選擇：優(yōu)先使用產(chǎn)品說明書推薦的專用復(fù)溶緩沖液，若無推薦可使用：
基礎(chǔ)型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保護(hù)型：在基礎(chǔ)緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢劑（如0.05% Triton X-100），酶類需添加輔酶因子
復(fù)溶步驟
短暫離心：將凍干蛋白管置于離心機(jī)，4℃下8000rpm離心30秒，使底部蛋白集中。
緩慢加液：沿管壁緩慢加入適量緩沖液，避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解：輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸，禁止渦旋振蕩（易導(dǎo)致蛋白變性）。
靜置溶解：4℃靜置10-30分鐘，難溶蛋白可延長(zhǎng)至1小時(shí)，期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
關(guān)鍵字： 人核糖體蛋白S6激酶β1;RPS6Kb1;重組蛋白;
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