人鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白適用于神經(jīng)酰胺合成體外酶學分析、鞘磷脂水解活性測定、骨發(fā)育相關(guān)信號通路與細胞凋亡機制探究實驗。
型號：YS-DB2630
產(chǎn)品名稱：人鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 3 (SMPD3)
NSMASE2; Neutral Sphingomyelinase II
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：：分泌
預測分子量：29.9kDa
實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽：Asp417~Gly651 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性狀：凍干粉
純度：> 97%
等電點：4.8
應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
底物水解反應機制：SMPD3 水解鞘磷脂磷酸二酯鍵，裂解生成神經(jīng)酰胺與磷酸膽堿，以底物消耗量或產(chǎn)物生成量作為活性判定依據(jù)。
熒光底物分光檢測：使用熒光標記鞘磷脂模擬底物，酶切后釋放游離熒光基團，熒光強度與酶活性線性正相關(guān)，實現(xiàn)微量活性定量。
抗體免疫印跡驗證：特異性 SMPD3 抗體結(jié)合重組目的蛋白，條帶分子量匹配理論值，證明蛋白翻譯、折疊、表達無誤。
空白對照扣除校正：設置無酶空白、滅活酶對照組，扣除自發(fā)水解背景值，消除緩沖液、雜質(zhì)酶對活性檢測結(jié)果的干擾。
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使用操作指南：
復溶操作
原核表達凍干粉：用無菌超純水或指定緩沖液復溶，100μg蛋白加入86μL溶劑，輕輕搖晃或用移液槍輕吹溶解，禁止渦旋振蕩。
真核表達溶液態(tài)：直接取用，如需稀釋需使用匹配的緩沖液，避免劇烈操作。
儲存條件
未復溶凍干粉：-20℃或-80℃保存，避免反復凍融，有效期通常為1-2年。
復溶后溶液：分裝成單次使用量，-20℃或-80℃保存，避免多次凍融，有效期建議為1-3個月。
常見問題處理
標簽影響功能：若用于蛋白功能或藥物研究，優(yōu)先選擇無標簽蛋白，或與去標簽版本做對照實驗。
批間差異：使用前核對CoA（分析證書），必要時進行批次間活性、純度對比驗證。
內(nèi)毒素干擾：細胞實驗前采用內(nèi)毒素去除試劑盒處理，或直接選擇低內(nèi)毒素級別的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： 人鞘磷脂磷酸二酯酶3;SMPD3;重組蛋白;
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