人鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)重組蛋白用于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鞘磷脂代謝體外酶活測定、細胞器脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)調(diào)控研究、細胞應(yīng)激與自噬相關(guān)分子機制體外功能實驗。
型號：YS-DB2632
產(chǎn)品名稱：人鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMPD4)
NSMASE3; NET13; Neutral Sphingomyelinase-3
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：：分泌
預(yù)測分子量：19.1kDa
實際分子量：19kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：Ala10~His148 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 97%
等電點：7.2
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
磷脂鍵特異性水解：靶向鞘磷脂分子磷酸二酯位點催化水解，產(chǎn)物為神經(jīng)酰胺與磷酸膽堿，通過產(chǎn)物定量反映 SMPD4 催化活性。
高效液相色譜 (HPLC) 定量檢測：反應(yīng)終止后 HPLC 分離底物與水解產(chǎn)物，峰面積外標(biāo)法精準計算底物轉(zhuǎn)化率，量化酶活水平。
免疫印跡定性質(zhì)控：利用 SMPD4 特異性抗體雜交，確認重組蛋白分子量、純度，排除降解、雜蛋白污染問題。
pH 依賴性活性佐證：設(shè)置梯度 pH 反應(yīng)體系，匹配 SMPD4 生理最適 pH 特征，佐證檢測信號來源于目的蛋白特異性催化。
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蛋白復(fù)溶與保存：
1. 復(fù)溶前準備
實驗環(huán)境：在超凈工作臺內(nèi)進行操作，避免污染
試劑準備：無菌水、PBS緩沖液或產(chǎn)品說明書指定的復(fù)溶液
工具準備：無菌移液器、槍頭、離心管
2. 復(fù)溶步驟
短暫離心：將蛋白凍干粉管短暫離心（1000rpm，1min），使管壁和管蓋的蛋白粉末集中到管底
加入復(fù)溶液：按照說明書推薦的體積加入無菌水或指定復(fù)溶液，輕輕吹打混勻，避免渦旋振蕩防止蛋白變性
靜置溶解：室溫靜置5-10分鐘，期間可輕輕顛倒離心管幫助溶解，避免劇烈振蕩
分裝保存：根據(jù)實驗需要將復(fù)溶后的蛋白分裝成小份（如10μg/份），避免反復(fù)凍融
3. 保存條件
長期保存：-20℃或-80℃避光保存，加入50%甘油可提高穩(wěn)定性
短期保存：4℃可穩(wěn)定保存1-2周，需避免反復(fù)凍融
注意：
避免接觸強氧化劑、強酸強堿環(huán)境
若蛋白出現(xiàn)沉淀或渾濁，可4℃放置或短暫離心后取上清使用
關(guān)鍵字： 人鞘磷脂磷酸二酯酶4;SMPD4;重組蛋白;
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