本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，酶標板微孔包被抗大鼠ER特異性捕獲抗體，加入標準品與大鼠待測樣本后，樣本中的ER抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除游離雜質(zhì)，加入酶標記的ER檢測抗體形成夾心免疫復合物，底物顯色后顯色強度與ER含量正相關(guān)，終止反應(yīng)后檢測吸光度，結(jié)合標準曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒
英文名稱：ER ELISA Kit
貨號：Y-E1601
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測值0.09ng/mL，可精準檢測大鼠組織中微量雌二醇受體蛋白。
檢測范圍：0.3ng/mL - 9ng/mL，適配大鼠子宮、卵巢、乳腺、肝臟組織樣本。
反應(yīng)時間：總時長100分鐘，樣本孵育35min、酶抗體孵育30min、顯色30min、終止讀數(shù)5min。
保存條件：2 - 8℃避光冷藏，受體抗體試劑嚴禁冷凍，開封后密封保存。
有效期：未開封有效期6個月，溶解后的標準品當日作廢。
顯色系統(tǒng)：特異性蛋白顯色系統(tǒng)，受體結(jié)合顯色穩(wěn)定，無雜色干擾。
檢測波長：450nm主波長，620nm參比波長校正誤差。
標準曲線繪制：五梯度標準品擬合，四參數(shù)方程，R2≥0.994。
特異性：特異性結(jié)合大鼠ERα/ERβ受體，與其他激素受體無交叉反應(yīng)。
重復性：板內(nèi)CV≤4%，板間CV≤6%，實驗重復性良好。
注意事項：組織樣本需徹底裂解提取總蛋白，避免受體蛋白流失；孵育濕度保持飽和，防止孔內(nèi)液體蒸發(fā)；終止后快速讀數(shù)，避免顏色衰減。
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復溶后標準品：分裝 - 20℃凍存，避免反復凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實驗步驟如下：
ER 凍干標準品復溶稀釋，試劑盒室溫平衡 33min，劃分酶標板孔位；
各微孔添加 50μL 標準品或大鼠子宮組織裂解液，空白孔填充稀釋緩沖液；
快速加入 100μL HRP 標記抗 ER 檢測抗體，密封酶標板；
37℃避光孵育 70min，一步同步結(jié)合樣本抗原與標記抗體；
洗板液浸泡微孔 35s，拍干，重復洗滌 6 次；
避光添加顯色底物混合液 100μL，37℃避光反應(yīng) 14min；
終止液混勻，450nm 檢測 OD 值，換算 ER 濃度。
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