本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，固相酶標(biāo)板包被大鼠PGR特異性捕獲抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品和大鼠待測(cè)樣本后，樣本中的孕酮受體與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)，加入酶標(biāo)記PGR檢測(cè)抗體孵育形成特異性免疫復(fù)合物，底物顯色后吸光度與樣本中PGR含量呈正相關(guān)，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1053 |
英文名稱 | PGR ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.12ng/mL
檢測(cè)范圍：0.3ng/mL - 18ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：全程160分鐘（樣本孵育100min，酶標(biāo)孵育30min，顯色30min）
保存條件：2-8℃冷藏避光，開(kāi)封試劑1個(gè)月內(nèi)用完
有效期：未開(kāi)封儲(chǔ)存有效期9個(gè)月
特異性：特異性結(jié)合大鼠孕酮受體，與雌激素受體、雄激素受體無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤6%，板間變異系數(shù)CV≤8%
注意事項(xiàng)：組織樣本需充分裂解提取蛋白；避免高溫、反復(fù)凍融導(dǎo)致受體蛋白變性；實(shí)驗(yàn)對(duì)照嚴(yán)格設(shè)置
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫回溫 30min，配比洗滌液，梯度稀釋 PGR 標(biāo)準(zhǔn)品，酶標(biāo)板分區(qū)標(biāo)記實(shí)驗(yàn)孔位。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入梯度孕酮受體標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，待測(cè)孔加入 50μL 大鼠子宮組織上清，空白孔不加試劑。
檢測(cè)孔加入一步法酶標(biāo)記二抗工作液 100μL，封板膜密封，37℃孵育 55min。
棄去孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡 40s 甩干，重復(fù)洗板 5 次，徹底清洗微孔雜質(zhì)。
每孔加入顯色液 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 16min。
逐孔添加終止液 50μL 終止顯色，水平震蕩混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè) OD 值，擬合曲線定量 PGR 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠孕酮受體;PGR;ELISA試劑盒;
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