雙抗體夾心免疫酶聯(lián)吸附，微孔板預(yù)包被 c-jun 捕獲抗體，樣本中轉(zhuǎn)錄因子 c-jun 特異性結(jié)合板底，酶標記檢測抗體識別抗原，洗板顯色后讀取 OD 值，定量細胞應(yīng)激、增殖相關(guān) c-jun 蛋白。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠c-jun ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1037 |
英文名稱 | Rat c-jun ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測靈敏度0.05ng/mL，可檢測低豐度大鼠c-jun轉(zhuǎn)錄蛋白
檢測范圍：0.1ng/mL - 80ng/mL，適配大鼠神經(jīng)、腫瘤、炎癥相關(guān)樣本檢測
反應(yīng)時間：總實驗時長130分鐘，樣本溫育70分鐘，酶標孵育30分鐘，顯色15分鐘，終止平衡5分鐘
保存條件：試劑盒整體2 - 8℃冷藏避光保存，洗滌液室溫保存，標準品密封冷藏
有效期：未開封有效期6個月，開封后1個月內(nèi)使用完畢
顯色系統(tǒng)：穩(wěn)定型TMB雙組分顯色系統(tǒng)，顯色梯度均勻
檢測波長：450nm為主檢測波長，630nm為參考波長
標準曲線繪制：6點梯度濃度梯度，四參數(shù)擬合曲線，R2≥0.995
特異性：特異性結(jié)合大鼠c-jun蛋白，與c-fos、JNK等相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤6%，板間變異系數(shù)≤8%
注意事項：樣本需無蛋白降解，避免高溫、久置；試劑回溫后充分混勻再使用；上機檢測前檢查每孔無氣泡、無雜質(zhì)
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程：
試劑平衡：全套試劑室溫平衡 22min，20 倍濃縮洗滌液稀釋，細胞裂解液混勻無沉淀。
標準品稀釋：c-jun 凍干標準品復(fù)溶梯度稀釋 6 濃度，空白調(diào)零孔。
加樣孵育：50μL 標準品 / 樣本 + 50μL HRP 酶抗體，封膜 37℃避光孵育 58min。
洗板操作：洗滌液浸泡 30s，拍干，洗板 5 次。
底物顯色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 13min。
終止讀數(shù)：終止液混勻，8min 內(nèi)檢測 OD450。
數(shù)據(jù)計算：曲線定量 c-jun，檢測細胞應(yīng)激轉(zhuǎn)錄激活水平。
關(guān)鍵字： 大鼠;c-jun ;ELISA試劑盒;
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