雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理,微孔板預(yù)包被抗 L-LDH 捕獲抗體,樣本 L 型乳酸脫氫酶結(jié)合固相載體,酶標檢測抗體結(jié)合靶蛋白,洗滌顯色后 OD 值與 L-LDH 含量正相關(guān),定量細胞損傷指標。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1061 |
英文名稱 | L-LDH ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測限0.1U/L,可精準檢測大鼠微量L-LDH酶活性
檢測范圍:0.2U/L - 160U/L,覆蓋大鼠組織損傷、代謝紊亂樣本濃度區(qū)間
反應(yīng)時間:總反應(yīng)時長125分鐘,樣本孵育65分鐘,酶孵育30分鐘,顯色15分鐘,終止5分鐘
保存條件:2 - 8℃避光冷藏保存,酶類試劑禁止冷凍,防止蛋白變性失活
有效期:原裝試劑盒有效期6個月,合規(guī)儲存可穩(wěn)定保質(zhì)
顯色系統(tǒng):適配乳酸脫氫酶檢測的專用TMB顯色體系,顯色響應(yīng)靈敏
檢測波長:450nm主波長檢測,630nm校正背景誤差
標準曲線繪制:6點梯度標準濃度,四參數(shù)曲線擬合,R2≥0.995
特異性:特異性識別大鼠L-LDH,與D-LDH及其他脫氫酶無交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤6%,板間CV≤8%,實驗重復(fù)性良好
注意事項:嚴禁使用溶血樣本,溶血會導(dǎo)致LDH假性升高;樣本低溫制備、及時檢測;所有試劑回溫至室溫后再進行實驗操作
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
試劑平衡:試劑室溫靜置 26min,濃縮洗滌液稀釋 20 倍,細胞培養(yǎng)上清混勻。
標準品稀釋:L-LDH 標準品稀釋配制 6 梯度標準液,空白調(diào)零孔。
加樣孵育:各孔 50μL 標準品、樣本,酶結(jié)合物 50μL,37℃避光孵育 61min。
洗板操作:洗滌液浸泡 32s,拍干,洗板 5 次。
底物顯色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 15min。
終止讀數(shù):終止液混勻,9min 內(nèi)讀取 450nm 吸光值。
數(shù)據(jù)計算:標準曲線定量 L-LDH,評估細胞壞死損傷程度。
關(guān)鍵字: 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶;L-LDH;ELISA試劑盒;
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