本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，固相載體酶標(biāo)板包被有抗人D-LDH特異性抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品與待測生物樣本后，樣本中的D-乳酸脫氫酶與固相抗體特異性結(jié)合，洗除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入HRP標(biāo)記的D-LDH檢測抗體，形成特異性免疫復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，通過酶標(biāo)儀檢測吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量測定樣本中D-LDH的活性及含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人D-乳酸脫氫酶(D-LDH) ELISA試劑盒
英文名稱：D-LDH Elisa Kit
貨號：Y-E916
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測活性0.5U/L，可精準(zhǔn)檢測體液中微量酶活性
檢測范圍：1U/L - 60U/L，適配腸道損傷、代謝紊亂相關(guān)樣本檢測
反應(yīng)時間：全流程反應(yīng)時長85分鐘，酶促反應(yīng)速率穩(wěn)定
保存條件：2-8℃避光密封保存，酶試劑組分需單獨妥善存放，避免失活
有效期：標(biāo)準(zhǔn)儲存條件下有效期12個月
特異性：專一檢測人D-乳酸脫氫酶，不與L-乳酸脫氫酶發(fā)生交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異＜6%，板間變異＜8%，酶活性檢測重復(fù)性良好
注意事項：樣本采集后需低溫靜置，避免酶活性失活；實驗全程避免劇烈震蕩，防止酶蛋白變性
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
試劑室溫放置 28min，配制洗滌液；D-LDH 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋配制梯度濃度，待測樣本離心去除雜質(zhì)沉淀。
酶標(biāo)板設(shè)孔，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本孔分別加液 100μL，空白孔加入等量樣本稀釋液。
所有孔一次性加入酶結(jié)合檢測液 100μL，輕柔混勻后封板包裹。
37℃恒溫孵育 50min，全程避光操作。
洗板操作：棄廢液，洗滌液浸泡 30s 拍干，重復(fù) 4 次洗板，吸干微孔殘留液體。
加入底物顯色液 100μL，室溫遮光顯色 13min。
終止液終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 讀值，換算樣本 D-LDH 酶活性濃度。
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關(guān)鍵字： 人D-乳酸脫氫酶;D-LDH;ELISA試劑盒;
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