采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，固相載體包被抗大鼠 Smad7 捕獲抗體，樣本內(nèi)源 Smad7 蛋白特異性吸附于微孔，洗滌后添加 HRP 標(biāo)記抗 Smad7 檢測抗體構(gòu)建夾心免疫復(fù)合物，TMB 底物顯色，酶標(biāo)儀讀數(shù)對照標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠Smad7 ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1166 |
英文名稱 | Smad7 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測靈敏度≤1.8pg/mL
檢測范圍：4pg/mL - 1000pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長180分鐘（90分鐘樣本結(jié)合+30分鐘二抗結(jié)合+30分鐘顯色）
保存條件：2-8℃避光冷藏，嚴(yán)禁冷凍，開封試劑7天內(nèi)使用完畢
有效期：原裝未開封試劑盒12個(gè)月
顯色系統(tǒng)：高靈敏度TMB顯色體系，背景值低、顯色穩(wěn)定
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：標(biāo)準(zhǔn)品梯度濃度對應(yīng)OD值，四參數(shù)Logistic回歸擬合曲線，計(jì)算樣本濃度
特異性：特異性結(jié)合大鼠Smad7蛋白，與其他Smad家族拮抗蛋白無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤9%
注意事項(xiàng)：樣本避免高溫處理，防止蛋白變性；溫育過程密封避光，防止液體蒸發(fā)濃縮；標(biāo)準(zhǔn)品稀釋精準(zhǔn)，避免曲線偏差。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑平衡：全部試劑室溫放置 26min，20× 洗滌液蒸餾水稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品配制：Smad7 標(biāo)準(zhǔn)品溶解后倍比稀釋，6 組梯度，雙復(fù)孔檢測。
樣本加樣：標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)液，細(xì)胞 / 組織裂解樣本 50μL 上樣。
共孵育：每孔 50μL HRP 標(biāo)記 Smad7 抗體，密封 37℃避光孵育 56min。
洗板：洗滌液浸泡 30s，徹底拍干，洗板 5 次。
顯色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 15min。
終止讀數(shù)：終止液混勻，6min 內(nèi) 450nm 測 OD 值，換算 Smad7 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠;Smad7;ELISA試劑盒;
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