本試劑盒采用競爭性ELISA檢測原理，將CA抗原包被于酶標板微孔，封閉后加入標準品、待測大鼠體液樣本和CA特異性免疫抗體，樣本中的CA與固相包被CA競爭結合有限抗體，樣本CA含量越高，結合在酶標板上的抗體越少，洗板去除未結合反應物后，加入酶標記二抗和顯色底物進行顯色，終止后測定吸光度，通過標準曲線的負相關關系計算樣本中CA的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒

英文名稱：CA ELISA Kit
貨號：Y-E1299

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測限0.05nmol/L，可檢測大鼠血漿、尿液中極低濃度兒茶酚胺

檢測范圍：0.1nmol/L～20nmol/L，適配大鼠生理、病理狀態(tài)下CA濃度檢測需求

反應時間：總反應時長120分鐘，抗體溫育90分鐘，顯色反應30分鐘，無需提前孵育

保存條件：全套試劑2～8℃避光冷藏，顯色液、終止液需單獨避光存放，禁止高溫暴曬

有效期：原裝未拆封有效期6個月，開蓋后試劑密封冷藏，20天內使用完畢

顯色系統(tǒng)：高純度TMB顯色體系，顯色均勻，靈敏度高，終止后顏色穩(wěn)定不褪色

檢測波長：主檢測波長450nm，輔助校正波長570nm，降低雜光干擾

標準曲線繪制：設置7個梯度標準濃度，采用四參數(shù)擬合曲線，線性相關系數(shù)R2≥0.993，擬合度優(yōu)異

特異性：特異性識別大鼠去甲腎上腺素、腎上腺素、多巴胺等兒茶酚胺類物質，與其他胺類物質無交叉反應

重復性：板內CV≤5%，板間CV≤7%，高低濃度樣本重復性均達標

注意事項：CA樣本極易氧化，采集后需立即低溫離心、避光保存；實驗全程避免手部、器具污染試劑；顯色時間需嚴格把控，超時會導致數(shù)值偏差；廢棄試劑按生化廢液規(guī)范處理。
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結合物、神經(jīng)遞質 / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫回溫 23min，洗滌緩沖液 1:19 稀釋，大鼠腎上腺勻漿避光冰浴，防止兒茶酚胺氧化。

微孔板分孔添加 100μL CA 梯度標準品、腎上腺上清、空白緩沖液。

酶標記抗原工作液 100μL 每孔，覆膜 37℃孵育 54min。

洗滌浸泡 26s，洗滌 3 次，吸干微孔殘留液體。

避光 TMB 顯色液 100μL，37℃孵育 12min。

終止液混勻微孔，終止顯色。

450nm 測 OD，計算大鼠總兒茶酚胺 CA 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：