本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA原理定量檢測(cè)大鼠樣本中CA-2含量。酶標(biāo)板預(yù)先固化純化的大鼠CA-2特異性抗體，加入待測(cè)樣本與標(biāo)準(zhǔn)品后，樣本內(nèi)CA-2抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除未結(jié)合組分，隨后加入酶標(biāo)記CA-2檢測(cè)抗體形成免疫復(fù)合物，底物催化顯色后，吸光度數(shù)值與CA-2濃度呈正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸分析即可得到樣本中CA-2的準(zhǔn)確含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1200 |
英文名稱 | CA-2 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.3U/L，精準(zhǔn)檢測(cè)大鼠腎臟、紅細(xì)胞、肺組織中CA-2酶含量。
檢測(cè)范圍：0.6U/L - 22U/L，覆蓋酸堿代謝、腎臟損傷模型大鼠CA-2表達(dá)區(qū)間。
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長(zhǎng)110分鐘，抗原抗體結(jié)合85分鐘，顯色25分鐘。
保存條件：酶試劑2-8℃冷藏避光，嚴(yán)禁高溫，洗滌液室溫密封保存。
有效期：未開(kāi)封有效期6個(gè)月，開(kāi)封后25天內(nèi)使用完畢。
特異性：特異性結(jié)合大鼠CA-2蛋白，與CA1、CA3等碳酸酐酶亞型無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤8.3%，代謝酶檢測(cè)數(shù)據(jù)可靠。
注意事項(xiàng)：樣本避免酸堿污染，實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度恒定，避免影響酶活性檢測(cè)結(jié)果。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫放置 33min 復(fù)溫，稀釋洗滌液，逐級(jí)稀釋 CA-2 標(biāo)準(zhǔn)品制備濃度梯度，取用酶標(biāo)板條，剩余板條密封低溫存放。
區(qū)分空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔；標(biāo)準(zhǔn)品孔加標(biāo)準(zhǔn)液 50μL，樣本孔加入待測(cè)樣本 50μL，空白孔無(wú)添加。
除空白孔外每孔加入酶標(biāo)抗體工作液 100μL，封板密封，37℃恒溫孵育 64min。
揭膜棄廢液，洗滌液注滿每孔浸泡 40s，徹底拍干，洗板循環(huán) 5 次。
依次加入顯色底物 A、B 各 50μL，輕微震蕩混勻，37℃避光顯色 15min。
每孔添加終止液 50μL，混勻終止酶促反應(yīng)。
450nm 波長(zhǎng)測(cè)吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 CA-2 樣本含量。
關(guān)鍵字： 大鼠碳酸酐酶2;CA-2;ELISA試劑盒;
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