競(jìng)爭(zhēng)抑制 ELISA 檢測(cè)原理，微孔板包被 GABA 偶聯(lián)固相抗原，樣本游離 GABA 與板上抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)記抗 GABA 抗體，洗滌后底物顯色，OD 值隨樣本 GABA 濃度升高而降低，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線反向定量腦組織 / 體液 GABA 含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1329 |
英文名稱 | GABA ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)靈敏度≤0.05μmol/L
檢測(cè)范圍：0.1μmol/L - 10μmol/L
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育90分鐘，二抗孵育60分鐘，避光顯色20分鐘
保存條件：試劑盒2-8℃冷藏，底物液、終止液避光單獨(dú)保存，禁止冷凍
有效期：未開封有效期6個(gè)月，開封后1個(gè)月內(nèi)用完
顯色系統(tǒng)：高靈敏度TMB顯色體系，顯色均勻、穩(wěn)定性強(qiáng)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm檢測(cè)，620nm校正背景
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：以標(biāo)準(zhǔn)品梯度濃度為X軸，吸光度OD值為Y軸，四參數(shù)擬合生成標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本GABA含量
特異性：專一識(shí)別大鼠GABA分子，與谷氨酸、甘氨酸等神經(jīng)遞質(zhì)無(wú)交叉反應(yīng)，特異性極強(qiáng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤6%，板間變異系數(shù)≤8%，重復(fù)性優(yōu)異
注意事項(xiàng)：1. 腦組織、血清樣本需低溫離心處理，避免雜質(zhì)干擾；2. 全程避免強(qiáng)光直射，防止底物降解；3. 加樣精準(zhǔn)快速，減少孔間反應(yīng)誤差；4. 廢棄試劑按實(shí)驗(yàn)室危廢規(guī)范處理。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑平衡：試劑盒室溫平衡 22min，20 倍洗滌液稀釋，拆分酶標(biāo)板。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：GABA 標(biāo)準(zhǔn)品溶解配置 6 組梯度，空白零孔單獨(dú)設(shè)置。
樣本上樣：標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)液，腦組織勻漿、腦脊液樣本 50μL 上樣。
孵育反應(yīng)：每孔 50μL HRP 標(biāo)記 GABA 抗體，封膜 37℃避光孵育 59min。
洗板：洗滌液浸泡 30s，拍干，洗板 5 次。
顯色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃反應(yīng) 14min。
終止檢測(cè)：終止液混勻，8min 內(nèi) 450nm 讀數(shù)，計(jì)算 GABA 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠γ氨基丁酸;GABA;ELISA試劑盒;
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