雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法,固相微孔板預(yù)包被抗大鼠 IL-10 捕獲抗體,樣本分泌型 IL-10 結(jié)合固定抗體,洗板去除游離蛋白后加入酶標(biāo)記抗 IL-10 檢測(cè)抗體形成夾心復(fù)合物,顯色測(cè)吸光度,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 IL-10 含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1654 |
英文名稱 | IL-10 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測(cè)靈敏度≤1pg/mL
檢測(cè)范圍:2pg/mL - 250pg/mL
反應(yīng)時(shí)間:樣本孵育120分鐘,酶標(biāo)二抗孵育60分鐘,避光顯色15分鐘
保存條件:2-8℃避光冷藏保存,試劑密封存放,防止揮發(fā)污染
有效期:未開(kāi)封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng):優(yōu)化TMB顯色體系,顯色靈敏、梯度分明
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm主波長(zhǎng)檢測(cè)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:倍比稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)定OD值,四參數(shù)Logistic擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,換算樣本濃度
特異性:專一識(shí)別大鼠IL-10,與IL-4、IL-6等抗炎因子無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤7%,板間CV≤9%
注意事項(xiàng):1. 溶血、脂血樣本禁止使用,干擾檢測(cè)結(jié)果;2. 實(shí)驗(yàn)全程避光顯色;3. 不同批次試劑不可混用;4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束及時(shí)清理孔板及廢液。
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
本試劑盒僅科研體外檢測(cè),嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射,TMB 見(jiàn)光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃,溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2~8℃冷鏈,嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
試劑平衡:試劑盒室溫復(fù)溫 23min,20× 洗滌液蒸餾水稀釋,酶標(biāo)板拆分使用。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:IL-10 凍干標(biāo)準(zhǔn)品溶解配置 6 個(gè)梯度,現(xiàn)配立即使用。
樣本上樣:標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)液,巨噬細(xì)胞上清、血清樣本 50μL 上樣。
酶結(jié)合物孵育:每孔 50μL HRP 標(biāo)記 IL-10 抗體,封膜 37℃避光孵育 62min。
洗板:洗滌液浸泡 33s,拍干,循環(huán)洗板 5 次。
顯色:TMB 底物各 50μL,避光 37℃孵育 16min。
終止檢測(cè):終止液混勻,8min 內(nèi) 450nm 讀數(shù),換算 IL-10 濃度。
關(guān)鍵字: 大鼠白介素10;IL-10;ELISA試劑盒;
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