本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，將純化的抗大鼠IL-9抗體包被于酶標板微孔中，構(gòu)建固相免疫反應體系，樣本與標準品中的IL-9抗原特異性結(jié)合于固相抗體，洗滌后加入酶標記檢測抗體形成夾心復合物，經(jīng)底物顯色反應產(chǎn)生特異性顏色信號，顯色強度與IL-9抗原濃度呈正相關(guān)，終止反應后上機檢測，通過標準曲線計算樣本中IL-9的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒

英文名稱：IL-9 ELISA Kit
貨號：Y-E1580

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測濃度≤1.0pg/mL

檢測范圍：2.5pg/mL - 700pg/mL

反應時間：完整實驗流程3.5小時

保存條件：2-8℃低溫密封避光保存

有效期：未開封原裝6個月

顯色系統(tǒng)：經(jīng)典TMB-HRP顯色系統(tǒng)，底色干凈

檢測波長：450nm主波長檢測

標準曲線繪制：7梯度標準品，四參數(shù)擬合標準曲線

特異性：特異性結(jié)合大鼠IL-9，無同源細胞因子交叉反應

重復性：板內(nèi)CV≤7.8%，板間CV≤9.8%

注意事項：孵育溫箱濕度保持飽和，防止孔內(nèi)液體蒸發(fā)；所有耗材干凈無雜質(zhì)
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

室溫平衡試劑盒組分 29min，稀釋 IL-9 標準品，標記酶標板各類微孔；

標準孔加 50μL 梯度標準品，樣本孔加入大鼠血清 50μL，空白孔加稀釋液；

全部微孔加入 100μL 酶標記抗 IL-9 抗體，密封酶標板；

37℃避光孵育 63min，一步孵育完成免疫結(jié)合；

洗滌緩沖液浸泡 35s，吸干，洗板 5 次；

避光加入顯色底物 A、B 各 50μL，37℃避光顯色 16min；

終止液終止反應，450nm 讀取 OD 值，計算 IL-9 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：