雙抗體夾心 ELISA 法，微孔板固定抗大鼠 IL-1α 特異性捕獲抗體，樣本 IL-1α 抗原僅與對(duì)應(yīng)捕獲抗體結(jié)合，洗板后加入 HRP 標(biāo)記抗 IL-1α 檢測(cè)抗體形成夾心復(fù)合物，TMB 顯色讀數(shù)，單獨(dú)定量 IL-1α 蛋白水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1652 |
英文名稱 | IL-1偽 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)靈敏度≤2pg/mL
檢測(cè)范圍：4pg/mL - 290pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：恒溫孵育120分鐘，酶標(biāo)二抗反應(yīng)60分鐘，避光顯色15分鐘
保存條件：2-8℃避光冷藏，試劑密封保存，嚴(yán)禁冷凍
有效期：原裝未拆封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng)：TMB雙組分顯色系統(tǒng)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm檢測(cè)吸光度
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，檢測(cè)對(duì)應(yīng)OD值，四參數(shù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算IL-1α濃度
特異性：特異性識(shí)別大鼠IL-1α，不與IL-1β及其他細(xì)胞因子交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%
注意事項(xiàng)：1. 區(qū)分IL-1α與IL-1β檢測(cè)體系，試劑不可混用；2. 樣本無溶血、無渾濁；3. 嚴(yán)格控制孵育溫度時(shí)間；4. 實(shí)驗(yàn)全程規(guī)范操作避免污染。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑平衡：全部試劑室溫放置 27min，濃縮洗滌液 1:20 稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品配制：IL-1α 凍干標(biāo)準(zhǔn)品充分溶解，梯度稀釋 7 個(gè)濃度梯度。
加樣：標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品，上皮細(xì)胞、損傷組織勻漿 50μL 加入檢測(cè)孔。
酶抗體孵育：每孔 50μL HRP-IL-1α 特異性抗體，密封 37℃避光孵育 68min。
洗板：洗滌液浸泡 38s，拍干，洗板 6 次。
顯色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 19min。
終止讀數(shù)：終止液搖勻，9min 內(nèi) 450nm 檢測(cè)，計(jì)算 IL-1α 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠白介素1α;IL-1α;ELISA試劑盒;
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