本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA技術(shù)檢測人樣本中白介素1α(IL-1α)含量。微孔板固相包被IL-1α特異性捕獲抗體，待測樣本中的IL-1α抗原可特異性結(jié)合于固相抗體表面，洗板去除未結(jié)合的雜蛋白與體液雜質(zhì)。隨后加入HRP標(biāo)記的IL-1α檢測抗體，形成夾心免疫復(fù)合物，充分洗滌后加入TMB底物顯色，酶促反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物。終止反應(yīng)后檢測吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中IL-1α濃度呈正相關(guān)，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人白介素1α(IL-1α )ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E145 |
英文名稱 | IL-1α Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：≤4.2pg/mL
檢測范圍：14pg/mL–1020pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：室溫孵育 80min，二抗 55min，顯色 19min
顯色系統(tǒng)：雙組分 TMB 顯色
檢測波長：450nm，參比 630nm
特異性：專一識別 IL-1α，與 IL-1β 無交叉顯色
重復(fù)性：板內(nèi) CV＜5.7%，板間 CV＜7.8%
注意事項(xiàng)：細(xì)胞裂解樣本需添加蛋白酶抑制劑防止降解
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 33min，取出預(yù)包被酶標(biāo)板，截取適配板條并編號標(biāo)記。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入系列稀釋 IL-1α 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL；待測孔加入細(xì)胞裂解稀釋樣本 50μL；空白孔無試劑添加。
非空白孔加入一步法酶偶聯(lián)一抗工作液 50μL，緩慢晃動酶板混勻，封板膜密封微孔。
37℃恒溫避光孵育 73min，避免強(qiáng)光照射試劑。
傾倒廢液，洗板液注滿微孔浸泡 41s，拍干水漬，連續(xù)洗板 6 次。
每孔依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，避光搖勻，37℃避光顯色 18min。
加入終止液 50μL 終止顯色，充分混勻后 5min 內(nèi) 450nm 測吸光度，定量 IL-1α 含量。
關(guān)鍵字： 人白介素1α;IL-1α ;ELISA試劑盒;
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