雙抗體夾心 ELISA 體系，固相微孔板包被抗大鼠 IL-17 捕獲抗體，樣本分泌 IL-17 結(jié)合固定抗體，洗滌去除游離蛋白后加入 HRP 標(biāo)記抗 IL-17 檢測抗體形成夾心復(fù)合物，顯色讀取吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 IL-17 表達(dá)量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1484 |
英文名稱 | IL-17 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測靈敏度≤1pg/mL
檢測范圍：2pg/mL - 200pg/mL
反應(yīng)時間：孵育120分鐘，二抗反應(yīng)60分鐘，避光顯色15分鐘
保存條件：2-8℃避光冷藏，試劑密封防潮存放
有效期：原裝試劑盒有效期6個月
顯色系統(tǒng)：TMB底物顯色，硫酸終止液終止顯色
檢測波長：450nm檢測吸光度
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋，測定OD值，四參數(shù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，換算樣本濃度
特異性：專一識別大鼠IL-17，與IL-17家族其他亞型及其他炎癥因子無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%
注意事項：1. 炎癥樣本需充分離心澄清；2. 避光顯色，防止底物氧化；3. 恒溫孵育，保證實驗重復(fù)性；4. 廢棄試劑規(guī)范處理。
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程：
試劑平衡：試劑盒室溫放置 30min，洗滌液 1:20 稀釋，底物避光存放。
標(biāo)準(zhǔn)品制備：IL-17 凍干標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋 7 個梯度，雙復(fù)孔檢測。
加樣：標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品，關(guān)節(jié)組織、T 細(xì)胞上清樣本 50μL 加入檢測孔。
酶標(biāo)抗體孵育：每孔 50μL HRP-IL-17 抗體，密封 37℃避光孵育 70min。
洗板：洗滌液浸泡 40s，拍干，洗板 6 次。
顯色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 20min。
終止讀數(shù)：終止液混勻，10min 內(nèi) 450nm 測 OD 值，計算 IL-17 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠白介素17;IL-17;ELISA試劑盒;
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