本試劑盒運用雙抗體夾心ELISA檢測原理，將高特異性的大鼠SHBG單克隆抗體固定于微孔板固相載體上，加入梯度標準品及待測大鼠血清、組織等樣本后，樣本中的SHBG抗原與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，洗板去除游離雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標記的SHBG檢測抗體，形成特異性免疫夾心復(fù)合物，經(jīng)底物催化顯色、終止反應(yīng)后，利用酶標儀檢測吸光度，樣本OD值與SHBG濃度呈正比，依托標準曲線可精準測定樣本中性激素結(jié)合球蛋白的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒

英文名稱：SHBG ELISA Kit
貨號：Y-E1372

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.2nmol/L，可精準檢測大鼠血清中低濃度SHBG含量

檢測范圍：0.5nmol/L - 100nmol/L，覆蓋大鼠生理、病理狀態(tài)下SHBG正常表達區(qū)間

反應(yīng)時間：全流程實驗耗時85分鐘，操作簡便，溫育時長可控，適配批量樣本檢測

保存條件：試劑盒整體2-8℃冷藏保存，酶標板密封防潮存放，禁止高溫、冷凍環(huán)境放置

有效期：未開封試劑盒有效期6個月，恒溫恒濕條件下存放可維持試劑最佳活性

特異性：特異性識別大鼠SHBG，與雄激素、雌激素等性激素及結(jié)合蛋白無交叉結(jié)合反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均＜8%，實驗重復(fù)性佳，數(shù)據(jù)誤差符合科研檢測標準

注意事項：樣本需避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致蛋白變性影響檢測結(jié)果；實驗全程使用無酶無污染耗材，終止液為酸性試劑，避免接觸皮膚。
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒提前室溫回溫 28min，取出酶標板，規(guī)劃排布實驗孔位，粘貼孔位標簽區(qū)分組別。

凍干標準品用稀釋液復(fù)溶后梯度稀釋，標準孔加 55μL 梯度標品，樣本孔上樣 55μL 大鼠體液待測樣本，空白孔補稀釋液。

每孔加入辣根過氧化物酶標記檢測液 110μL，封板后置于 37℃恒溫箱孵育 55min。

棄去孔中反應(yīng)液，洗板液灌滿微孔，浸泡 25s 后甩干，重復(fù)洗板 4 次，吸水紙吸干板底水分。

單孔先后加入顯色液 A 50μL、顯色液 B 50μL，避光 37℃避光反應(yīng) 12min。

滴加 55μL 終止液終止反應(yīng)，輕微振蕩酶標板 30s 混勻體系。

450nm 波長酶標儀讀數(shù)，依托標準曲線計算 SHBG 樣本濃度數(shù)值。
公司正在出售的產(chǎn)品：