本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，將純化的大鼠INHBP特異性抗體包被于酶標(biāo)板微孔，作為固相捕獲載體，加入標(biāo)準(zhǔn)品與大鼠待測(cè)樣本后，樣本中的抑制素結(jié)合蛋白與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離成分，再加入酶標(biāo)記的INHBP檢測(cè)抗體形成免疫復(fù)合物，經(jīng)底物顯色反應(yīng)后，依據(jù)吸光度值和標(biāo)準(zhǔn)曲線，可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中INHBP的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒
英文名稱：INHBP ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1077
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.09ng/mL
檢測(cè)范圍：0.2ng/mL - 8ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：全程150分鐘（樣本孵育90min，酶標(biāo)孵育30min，顯色30min）
保存條件：2-8℃冷藏避光，所有試劑避免室溫長時(shí)間放置
有效期：未開封儲(chǔ)存有效期8個(gè)月
特異性：特異性結(jié)合大鼠INHBP，不與抑制素、激活素及其他結(jié)合蛋白交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤5%，板間變異系數(shù)CV≤8%
注意事項(xiàng)：組織勻漿樣本需去除脂質(zhì)雜質(zhì)；試劑平衡室溫后再使用；空白對(duì)照、陰性對(duì)照必須同步設(shè)置
通用注意事項(xiàng)：
樣本要求
血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。
溫度控制
孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。
避光操作
TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。
洗板規(guī)范
洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。
污染防控
實(shí)驗(yàn)耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。
安全防護(hù)
終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。
失效判定
試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。
稀釋校正
樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。
空白對(duì)照
空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。
儲(chǔ)存禁忌
試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫平衡 30min，稀釋濃縮洗滌液，配制 INHBP 梯度標(biāo)準(zhǔn)液，標(biāo)記酶標(biāo)板各組微孔。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入梯度 INHBP 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，待測(cè)孔加入 50μL 大鼠血漿樣本，空白孔無液體添加。
全部檢測(cè)孔加入一步法酶偶聯(lián)抗原工作液 100μL，覆膜封板，37℃孵育 60min。
棄液洗板，洗滌液浸潤微孔 40s 后甩干，重復(fù)洗板 5 次，拍凈多余洗滌液。
每孔加入顯色 A 液、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 15min。
加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)，水平震蕩混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定 OD 值，定量樣本抑制素結(jié)合蛋白 INHBP 水平。
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關(guān)鍵字： 大鼠抑制素結(jié)合蛋白;INHBP;ELISA試劑盒;
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