本試劑盒采用競爭法ELISA檢測原理，通過在微孔板中固定雄烯二酮固相抗原，加入待測大鼠樣本和特異性抗體后，樣本中的ASD抗原與固相抗原競爭性結(jié)合抗體活性位點，孵育結(jié)束后洗滌去除未反應(yīng)物質(zhì)，加入酶標(biāo)記抗體孵育，使其與結(jié)合在固相的抗體結(jié)合，隨后加入底物液發(fā)生酶促顯色反應(yīng)，終止反應(yīng)后測定吸光度，OD值與樣本中ASD含量呈負(fù)相關(guān)，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量檢測大鼠樣本中雄烯二酮的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒
英文名稱：ASD ELISA Kit
貨號：Y-E1615
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.08ng/mL，可精準(zhǔn)捕捉大鼠體內(nèi)低濃度雄烯二酮含量
檢測范圍：0.2ng/mL - 40ng/mL，適配大鼠內(nèi)分泌、生殖相關(guān)實驗樣本檢測
反應(yīng)時間：全流程反應(yīng)耗時95分鐘，分步溫育、顯色，反應(yīng)體系穩(wěn)定
保存條件：所有試劑組分2-8℃避光密封保存，洗滌液可常溫短期存放，長期需冷藏
有效期：原裝未開封試劑盒有效期6個月，開封后建議2周內(nèi)用完標(biāo)準(zhǔn)品
特異性：專一性結(jié)合大鼠雄烯二酮，與睪酮、雌二醇等甾體激素?zé)o交叉干擾反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤7%，板間變異系數(shù)≤9%，實驗誤差符合科研標(biāo)準(zhǔn)
注意事項：樣本禁止溶血、脂血，否則會干擾抗原抗體結(jié)合；顯色反應(yīng)需嚴(yán)格把控時長，準(zhǔn)時終止反應(yīng)。
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實驗步驟如下：
試劑盒室溫靜置 26min，拆分微孔板條，劃分空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品組、實驗組并編號。
凍干標(biāo)準(zhǔn)品溶解后倍比稀釋，標(biāo)準(zhǔn)孔加 55μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)液，樣本孔加入 55μL 大鼠血清待測液，空白孔補稀釋液。
每孔加入酶標(biāo)記抗體液 110μL，覆膜密封，37℃恒溫孵育 62min。
洗板液注滿微孔浸泡 38s，甩干廢液，重復(fù)洗板 6 次，吸干板底水漬。
配制顯色底物混合液，每孔加 100μL，避光 37℃顯色 14min。
加入 60μL 終止液終止顯色反應(yīng)，左右晃動微孔板混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測 OD 值，計算標(biāo)準(zhǔn)曲線得到 ASD 樣本濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠雄烯二酮;ASD;ELISA試劑盒;
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