本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，檢測大鼠熱休克蛋白47（HSP47）濃度。微孔板預(yù)先包被HSP47特異性捕獲抗體，待測樣本中的HSP47抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗板后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫夾心結(jié)構(gòu)。底物酶促顯色后，終止反應(yīng)并檢測吸光度，數(shù)值大小與樣本中HSP47含量正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可實現(xiàn)精準(zhǔn)定量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測靈敏度0.18ng/mL，可精準(zhǔn)檢測大鼠纖維化組織中HSP47表達(dá)。

檢測范圍：0.5ng/mL - 95ng/mL，適配大鼠組織纖維化、膠原合成異常模型。

反應(yīng)時間：全流程90分鐘快速檢測，適配大批量纖維化樣本檢測。

保存條件：2 - 8℃避光冷藏，試劑密封存放，防止受潮、污染。

有效期：未開封有效期8個月，恒定低溫保存穩(wěn)定。

特異性：特異性靶向大鼠HSP47，與其他膠原結(jié)合蛋白、熱休克蛋白無交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%，實驗重復(fù)性良好。

注意事項：纖維化組織樣本需充分裂解，去除膠原雜質(zhì)；實驗全程避免高溫；洗板步驟規(guī)范，保證檢測精準(zhǔn)。
關(guān)鍵注意事項：

本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。

全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。

移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。

孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。

洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。

終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。

終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。

實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。

不同批次試劑盒組分不可混用。

試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

1. 試劑盒全部試劑室溫放置 32min，配制洗滌工作液；膠原相關(guān)組織勻漿離心過濾備用。

2. 排布酶標(biāo)板孔位，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度 HSP47 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入待測勻漿上清 50μL，空白孔空置。

3. 檢測孔直接添加酶標(biāo)記抗體工作液 100μL，嚴(yán)實封板防止揮發(fā)。

4. 37℃恒溫避光孵育 76min，充分進(jìn)行一步法免疫反應(yīng)。

5. 棄凈孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡 37s，洗板 6 次，微孔拍干無殘留液體。

6. 每孔加入顯色 A、B 液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 21min。

7. 加入終止液終止顯色，450nm 讀取吸光度，計算樣本 HSP47 含量。