本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，微孔板固相包被大鼠VEGF特異性捕獲抗體，加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品和待測大鼠血清、組織樣本后，樣本中的VEGF抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除未結(jié)合雜質(zhì)，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的VEGF檢測抗體，形成特異性免疫夾心復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀檢測吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中VEGF含量成正比，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)檢測大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒

英文名稱：VEGF ELISA Kit
貨號：Y-E1637

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度≤2pg/mL，可精準(zhǔn)檢測大鼠血清、組織中微量VEGF含量

檢測范圍：5pg/mL - 1000pg/mL，覆蓋大鼠血管生成、腫瘤、缺血模型濃度區(qū)間

反應(yīng)時間：全流程實(shí)驗(yàn)耗時90分鐘，反應(yīng)體系成熟，檢測穩(wěn)定性高

保存條件：試劑盒2-8℃避光冷藏，酶標(biāo)板剩余孔位密封保存，防止干燥失效

有效期：未開封原裝試劑盒有效期6個月

特異性：特異性結(jié)合大鼠VEGF，與其他生長因子無明顯交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均＜8%，重復(fù)性良好

注意事項(xiàng)：樣本采集后低溫保存，避免蛋白降解；實(shí)驗(yàn)全程避光操作，顯色液對光照敏感。
試劑盒組成：

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物

標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)

生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)

辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化

終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果

濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)

封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑室溫平衡 34min，拆分酶標(biāo)板，設(shè)置對照孔與檢測孔并做好標(biāo)記。

梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)孔加 50μL 標(biāo)品，細(xì)胞上清孔加入 50μL 大鼠待測樣品，空白孔加稀釋液。

每孔加入酶標(biāo)記二抗 100μL，封板避光 37℃孵育 70min。

手動洗板 6 次，洗滌液浸泡 33s / 次，徹底去除未結(jié)合反應(yīng)物。

每孔加入顯色底物 100μL，避光顯色 16min。

滴加 50μL 終止液終止反應(yīng)，混勻微孔內(nèi)液體。

450nm 波長檢測吸光度，擬合曲線計(jì)算 VEGF 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：